[发明专利]一种猪流行性腹泻病毒新变异毒株重组S1蛋白及其亚单位疫苗有效
| 申请号： | 201410315228.X | 申请日： | 2014-07-03 |
| 公开（公告）号： | CN104046637B | 公开（公告）日： | 2017-04-12 |
| 发明（设计）人： | 姜平;赵攀登;白娟 | 申请（专利权）人： | 南京农业大学 |
| 主分类号： | C12N15/50 | 分类号： | C12N15/50;C12N15/63;C12N5/10;A61K39/215;A61P31/14 |
| 代理公司： | 南京天华专利代理有限责任公司32218 | 代理人： | 李晓峰,徐冬涛 |
| 地址： | 211225 江苏省南京市溧*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明公开一种猪流行性腹泻病毒新变异毒株重组S1蛋白及其亚单位疫苗，该蛋白系将含有KDEL3基因序列、缺失III区的铜绿假单胞菌外毒素A基因序列和S1(m)基因序列的融合基因片段PE(△III)‑S1(m)‑KDEL3克隆至杆状病毒载体中获得重组载体，将所述的重组载体阳转DH10Bac感受态细胞进行重组载体位点特异性转座获得重组杆状质粒，将该重组杆状质粒在脂质体介导下转染Sf9细胞获得重组Sf9细胞，经该重组Sf9细胞表达获得。本发明在对S1基因哺乳动物密码子偏嗜性优化的基础上，首次利用杆状病毒表达系统表达PE(△III)‑S1(m)‑KDEL3融合蛋白，以期获得正确并高效表达融合蛋白的重组杆状病毒。经IFA和Western blot验证重组杆状病毒可正确表达融合蛋白且融合蛋白具有良好的反应原性。 | ||
| 搜索关键词： | 种猪 流行性 腹泻 病毒 变异 重组 s1 蛋白 及其 单位 疫苗 | ||
【主权项】：
一种猪流行性腹泻病毒变异毒株重组S1蛋白，其特征在于该蛋白是将含有KDEL3基因序列、缺失III区的铜绿假单胞菌外毒素A基因序列和S1(m)基因序列的融合基因片段PE(△III)‑S1(m)‑KDEL3克隆至杆状病毒载体中获得重组载体，将所述的重组载体阳转DH10Bac感受态细胞进行重组载体位点特异性转座获得重组杆状质粒，将该重组杆状质粒在脂质体介导下转染Sf9细胞获得重组Sf9细胞，经该重组Sf9细胞表达获得；所述S1(m)基因序列为SEQ ID NO.7，KDEL3是由3个相同蛋白质序列Lys‑Asp‑Glu‑Leu的串联组成。
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