[发明专利]一种富集与检测低浓度蒽醌类有效成分的方法

摘要

本发明提供了一种富集与检测低浓度蒽醌类有效成分的方法，该方法以四氧化三铁磁性石墨烯(rGO@Fe₃O₄)作为吸附剂，对低浓度的待检测样液进行萃取吸附，然后用解吸剂洗脱，洗脱液干燥后所得固体用溶解剂溶解，得到富集样液，富集样液用液质联用仪检测，通过标准曲线和富集倍数定量，检测得到低浓度的待检测样液中蒽醌类有效成分的浓度。本发明方法可用于检测大黄药材稀释液以及生物样本(大鼠尿样)中的低浓度蒽醌类有效成分。

主权项

一种富集与检测低浓度蒽醌类有效成分的方法，所述蒽醌类有效成分为芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚、大黄素甲醚中的一种或两种以上，其特征在于所述方法包括以下步骤：(1)反应容器中加入含有低浓度蒽醌类有效成分的待检测样品溶液，并加入四氧化三铁磁性石墨烯配成混合液，使混合液中四氧化三铁磁性石墨烯的浓度为0.0125mg/mL‑0.4000mg/mL，混合液的pH值为4‑8，震荡富集1～10min后，静置，将磁铁置于反应容器底部吸附固体，弃去液体，残留固体烘干后用解吸剂进行洗脱，所述解吸剂为甲醇、含体积分数1％乙酸的乙醇、含体积分数1％乙酸的乙腈、含体积分数1％乙酸的乙酸乙酯或含体积分数1～4％乙酸的甲醇，收集洗脱液、洗脱液干燥、所得固体用溶解剂溶解，得到富集样液，所述溶解剂为甲醇，富集样液离心，取上清液用液质联用仪检测，得到富集样液中蒽醌类有效成分的总离子流色谱图和各成分的提取离子色谱图；(2)以芦荟大黄素的对照品配制不同浓度的对照品溶液，按照富集样液同样条件用液质联用仪检测，获得芦荟大黄素对照品的提取离子色谱图，以芦荟大黄素对照品溶液的提取离子色谱图中色谱峰的峰面积为横坐标，以芦荟大黄素对照品的进样量为纵坐标制作芦荟大黄素标准曲线，按同样方法制作大黄酸标准曲线、大黄素标准曲线、大黄酚标准曲线、大黄素甲醚标准曲线；根据富集样液的各成分的提取离子色谱图中色谱峰的峰面积及各成分的标准曲线，计算得到富集样液中芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚、大黄素甲醚的含量，(3)计算富集倍数：取芦荟大黄素对照品，配制成浓度为0.25μg/mL的芦荟大黄素稀释液，按照步骤(1)的相同的方法条件，加入四氧化三铁磁性石墨烯进行富集检测，得到芦荟大黄素稀释液富集后的样液的提取离子色谱图，并将芦荟大黄素稀释液以相同条件用液质联用仪检测，得到芦荟大黄素稀释液的提取离子色谱图，芦荟大黄素稀释液富集后的样液的提取离子色谱图中芦荟大黄素色谱峰的峰面积与芦荟大黄素稀释液的提取离子色谱图中芦荟大黄素色谱峰的峰面积之比，即为芦荟大黄素的富集倍数；按照上述方法分别计算大黄酸、大黄素、大黄酚、大黄素甲醚的富集倍数；(4)根据芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚、大黄素甲醚各自的富集倍数，富集样液中芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚、大黄素甲醚的含量除以各自的富集倍数，换算得到待检测样品溶液中蒽醌类有效成分的含量。