[发明专利]一种用于烟草黑胫病抗性基因Ph辅助选择的分子标记及其应用

摘要

本发明提供了一种用于烟草黑胫病抗性基因Ph辅助选择的分子标记及其应用。本发明所述的分子标记为TM29和TM50，在第20号基因连锁群上分别位于基因Ph两侧，与之紧密连锁，分子标记TM29与Ph基因的遗传距离为0.091cM，分子标记TM50与Ph基因的遗传距离为0.148cM。本发明还提供了一种利用所述分子标记检测烟草黑胫病抗性基因Ph的分子标记方法，以及所述分子标记在烟草分子辅助育种和烟草黑胫病抗性基因Ph定位中的应用。利用本发明的分子标记辅助育种选择目标明确，节约成本，显著提高了选择效率，不仅为烟草黑胫病的育种提供了抗源筛选方法，而且可进一步通过染色体步移法接近基因Ph，从而为基因Ph的克隆奠定基础。

主权项

一种用于烟草黑胫病抗性基因Ph辅助选择的分子标记，其特征在于所述的分子标记为TM29和TM50，在第20号基因连锁群上分别位于基因Ph两侧，与之紧密连锁，分子标记TM29与Ph基因的遗传距离为0.091cM，分子标记TM50与Ph基因的遗传距离为0.148cM；分子标记TM29的引物对序列为：TM29F：5′‑AGACGGGGCTAAATTTGACA ‑3′；TM29R：5′‑AGCGGAAGAGTTGAGGACAA ‑3′；分子标记TM50的引物对序列为：TM50F：5′‑TCCTCTGAAGGCAGATGGAG ‑3′；TM50R：5′‑TGCCTTTACGAGATGCTGTG ‑3′；利用分子标记TM29引物对扩增得到的片段大小为469bp或479bp，469bp片段为含Ph基因的植株所特有，其序列为SEQ ID No.1，479bp片段为不含Ph基因的植株所特有，其序列为SEQ ID No.2；利用分子标记TM50引物对扩增得到的片段大小为459bp或433bp，459bp片段为含Ph基因的植株所特有，其序列为SEQ ID No.3，433bp片段为不含Ph基因的植株所特有，其序列为SEQ ID No.4。