[发明专利]一种从发酵液中连续提取谷氨酰胺转氨酶的方法有效
申请号: | 201410198961.8 | 申请日: | 2014-05-13 |
公开(公告)号: | CN103966181A | 公开(公告)日: | 2014-08-06 |
发明(设计)人: | 虞龙;李玉燕;李市场;黄思思;刘媛 | 申请(专利权)人: | 虞龙 |
主分类号: | C12N9/10 | 分类号: | C12N9/10;C12R1/55 |
代理公司: | 南京经纬专利商标代理有限公司 32200 | 代理人: | 王月霞;唐循文 |
地址: | 211306 江苏省南京*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | 一种从发酵液中连续提取谷氨酰胺转氨酶的方法,属于生物工程领域。发酵结束后发酵罐中通入无菌压缩空气,将发酵液从发酵罐中导出到陶瓷复合膜设备,除去菌体和杂质后的发酵液导入膜分离设备,超滤浓缩。以上各设备间以带流量控制阀门的管路相连接,设定参数后可连续运行,无需人员参与。浓缩后发酵液加入辅料后依次经溶剂沉淀、离心分离、再次加入辅料、真空干燥的步骤,得到谷氨酰胺转氨酶酶粉。本发明的优点是工艺合理连续、设备简单、操作简便、成本低廉,易于工业放大。本发明解决了不需要传统提取中盐析、透析、离子交换柱分离等步骤,易于工业化应用的技术问题。 | ||
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【主权项】:
一种从发酵液中连续提取谷氨酰胺转氨酶的方法,其特征在于包括如下步骤:1)往发酵液中通入无菌压缩空气,使罐内压力维持在0.05MP;将发酵液从发酵罐中导出到陶瓷复合膜,陶瓷复合膜的膜分离精度为50nm,发酵液进出速度为80L/h;2)将步骤1)经陶瓷复合膜分离得到的分离液导入膜分离设备,进行超滤浓缩,膜截留分子量为6000,控制酶液温度4~10℃;3)溶剂沉析:将步骤2)超滤得到的超滤浓缩液加1%辅料(w/w),以120rpm的速度搅拌5min后,以80rpm的速度继续搅拌并以500mL/min的通量加入1.5倍(V/V)于浓缩液体积的溶剂沉析4h,温度4~10℃;4)离心分离:将步骤3)溶剂沉析后的混合液离心,分离出酶泥;5)真空干燥:称取酶泥重量,加入1%(w/w)的辅料,搅拌混匀后进行真空干燥即得谷氨酰胺转氨酶酶粉。
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