[发明专利]一种制备酶传感器的过氧化氢的检测方法

摘要

一种制备酶传感器的过氧化氢的检测方法，该方法利用辣根过氧化物酶对过氧化氢的高催化性能，甲苯胺蓝‑石墨烯复合物对电极催化过氧化氢的信号放大作用，石墨烯的优良的导电性和大比表面积等特性，将辣根过氧化物酶修饰电极作为工作电极，参比电极为Ag/AgCl电极，辅助电极为铂电极，组成三电极体系，实现对过氧化氢的高灵敏检测；所述方法通过电聚合把酶负载在有机染料非共价功能化的石墨烯表面制备酶传感器。本发明通过电聚合把酶负载在有机染料非共价功能化的石墨烯表面制备酶传感器，由于功能化的石墨烯具有良好的电化学性能，将其引入到酶传感器中显著地提高了酶传感器的性能。本发明适用于酶传感器测定过氧化氢。

主权项

一种制备酶传感器的过氧化氢的检测方法，其特征在于，所述方法利用辣根过氧化物酶对过氧化氢的高催化性能，甲苯胺蓝‑石墨烯复合物对电极催化过氧化氢的信号放大作用，石墨烯的优良的导电性和大比表面积等特性，将辣根过氧化物酶修饰电极作为工作电极，参比电极为Ag/AgCl电极，辅助电极为铂电极，组成三电极体系，实现对过氧化氢的高灵敏检测；所述方法通过电聚合把酶负载在甲苯胺蓝非共价功能化的石墨烯表面制备酶传感器；所述方法的具体步骤为：(1)以石墨粉为原材料，通过Hummers氧化法制得氧化石墨烯，通过肼还原，制得石墨烯；(2)将0.5～2.0mmol/L的石墨烯与0.2～1.0mmol/L的甲苯胺蓝混合，超声10～24h，制得石墨烯‑甲苯胺蓝复合物，离心后用水洗涤，将石墨烯‑甲苯胺蓝复合物用水透析12～24h，除去未反应的甲苯胺蓝；(3)取5～20μl的石墨烯‑甲苯胺蓝复合物均匀的滴加在干净的玻碳电极表面，室温下自然晾干，用去离子水冲洗干净，得到石墨烯‑甲苯胺蓝修饰电极；(4)将石墨烯‑甲苯胺蓝修饰电极置于甲苯胺蓝和辣根过氧化物酶的溶液中，进行循环伏安法扫描，得到电聚合甲苯胺蓝/辣根过氧化物酶/石墨烯‑甲苯胺蓝修饰电极，该酶修饰电极即为目标酶传感器。