[发明专利]一种同时激活CD4+&CD8+T细胞的免疫细胞的培养方法

摘要

本发明属于肿瘤生物治疗领域，涉及一种同时激活CD4⁺&CD8⁺T细胞的免疫细胞培养方法。将分离好的单个核细胞置于含有rhIL-12、IL-4配体、IL-10配体的培养液中，培养8-12小时后加入左旋咪唑继续培养8-12小时，加入Anti-CD3McAb和rhIL-2，继续培养2-3天，然后交替加入含有rhIL-2的培养基和含Anti-CD3McAb、rhIL-2的培养基，中间的间隔培养时间为2-3天。制备细胞因子化合物的方案为：从培养开始后第3-14天收集细胞上清液、通过低温超速离心、超滤离心管超滤、微孔滤膜微滤，滤液为天然细胞因子混合物。本发明的培养方法，细胞可保持持续增殖，可达30天。NCM包含多种细胞因子，可刺激人体免疫细胞发挥自主免疫抗瘤活性。

主权项

一种同时激活CD4⁺ & CD8⁺ T细胞的免疫细胞的培养方法，其特征在于，将分离好的单个核细胞置于含有rhIL‑12、IL‑4配体、IL‑10配体的培养液中，培养8‑12小时后加入左旋咪唑继续培养8‑12小时，加入Anti‑CD3McAb和rhIL‑2，使其在培养液中浓度分别200‑600ng/mL和200‑500IU/mL，继续培养2‑3天，然后交替加入含有rhIL‑2的培养基和含Anti‑CD3McAb、rhIL‑2的培养基，中间的间隔培养时间为2‑3天。