[发明专利]一种尖顶羊肚菌优质菌株的筛选方法

摘要

一种尖顶羊肚菌优质菌株的筛选方法，包括菌株个体大小、菌盖形态及颜色、菌柄形态及颜色、孢子颜色及数量四级逐级淘汰筛选和菌核生成能力筛选。未淘汰的菌株接入PDA培养基中，进行菌丝生长速度、菌核生成时间及菌核生成数量筛选即可得到尖顶羊肚菌优质菌株。用本发明方法得到的优质菌株种植后生长速度快，出菇后7～10天即可收获，产生的尖顶羊肚菌菌株个体大，外观完美，鲜品产量可达到80kg以上/亩，且产量稳定，本发明筛选的优质菌种连续三年产量相差最大不到5%，解决了目前羊肚菌产业化发展中产量不稳定的技术问题。

主权项

一种尖顶羊肚菌优质菌株的筛选方法，其步骤如下：（1）菌株的个体大小、外部形态及颜色、产孢能力的逐级淘汰筛选①菌株个体大小筛选将采集到的无病虫害的尖顶羊肚菌菌株按个体大小分为三级：10 cm≤菌株个体长度≤15cm的为一级，5 cm≤菌株个体长度＜10cm的为二级，菌株个体长度＜5cm的为三级，淘汰第三级；②菌盖形态及颜色筛选将步骤（1）①未淘汰的菌株进行菌盖形态及颜色的比较，菌盖上的棱和凹坑完全展开、菌盖长度≥4 cm、2 cm≤菌盖最宽处的宽度≤5cm、菌盖颜色为黑色或黄褐色的为一级，其余为二级，淘汰第二级；③菌柄颜色及形态筛选将步骤（1）②未淘汰的菌株先进行菌柄颜色的比较，菌柄颜色为乳白色的为初选一级；菌柄颜色为白色或黄褐色的为初选二级，淘汰初选二级；再将菌柄颜色为乳白色的初选一级菌株进行菌柄形态的比较，其中无病害、菌柄最窄处的宽度≥1.5cm的为一级，其余为二级，淘汰第二级；④孢子颜色及数量筛选A. 孢子的收集，将洁净的A₄纸折成信封状，取下步骤（1）③未淘汰的尖顶羊肚菌的菌盖并去掉菌盖上的泥土，然后将菌盖的尖顶朝下放入信封中，封好，放在阳光下晒2～3天，得到尖顶羊肚菌孢子印，刮取孢子印得到孢子，孢子颜色为黄色的为一级孢子，孢子颜色为白色的为二级，淘汰第二级；B. 将一级孢子放入10ml无菌水的试管中，摇匀，配成孢子母悬液，取1ml孢子母悬液加入100ml的无菌水试管中，摇匀得第一次稀释孢子悬液，取第一次稀释孢子悬液1ml加入100ml的无菌水试管中，摇匀得第二次稀释孢子悬液，取第二次稀释孢子悬液1ml加入100ml的无菌水试管中，摇匀得第三次稀释孢子悬液，取第三次稀释孢子悬液1ml放在载玻片上，在显微镜下进行孢子计数，孢子个数≥10²个的为一级，孢子个数＜10²个的为二级，淘汰第二级；  （2）菌核生成能力筛选无菌条件下，挑取步骤（1）④B未淘汰的尖顶羊肚菌的菌株孢子放入10ml无菌水中，摇匀得到孢子母悬液，取孢子母悬液1ml放入100ml无菌水中，摇匀得到孢子悬液，此时取1ml的孢子悬液放入PDA培养基中，用灭菌的涂布棒进行涂布，25℃暗培养，待长出菌落时，挑取一个单菌落再接入PDA培养基中，25℃暗培养，此时得到单孢子菌丝，长满平皿后，取1.0cm×1.0cm菌块接入PDA培养基中，25℃条件下培养，观察记录菌丝生长速度，菌核生成时间及菌核生成数量，菌丝生长速度≥6.4mm/d、菌核数量≥40个、菌核生成时间≤7d且菌丝长满半径r=45mm的平皿的菌株为一级，其余为二级，淘汰第二级，得到的一级菌株即为尖顶羊肚菌优质菌株。