[发明专利]一种人血白蛋白的生产方法

摘要

本发明公开了一种人血白蛋白的生产方法，其技术方案要点是一种人血白蛋白的生产方法，主要包括血浆的合并与融化、组分I的制作与离心、组分II+III的制作和压滤、组分IV的制作和压滤、组分V的制作和压滤、组分V沉淀溶解过滤、超滤透析浓缩、配制、巴氏灭活、除菌灌装、孵放、检定的步骤，所述超滤透析浓缩的步骤中调节pH值至5.5~6.0，调节氯化钠浓度至1.5~2.0%，旨在提供一种铝离子含量低，产品质量高的人血白蛋白的生产方法。

主权项

一种人血白蛋白的生产方法，主要包括血浆的合并与融化、组分I的制作与离心、组分II+III的制作和压滤、组分IV的制作和压滤、组分V的制作和压滤、组分V沉淀溶解过滤、超滤透析浓缩、配制、巴氏灭活、除菌灌装、孵放、检定的步骤，其特征是：所述超滤透析浓缩的步骤中调节pH值至5.5~6.0，调节氯化钠浓度至1.5~2.0%；所述超滤透析浓缩过程中采用连续等倍透析法与梯度升温法相结合进行操作；步骤具体为：（1）、血浆的合并与融化，将温度低于‑5℃的血浆置于解冻罐内，罐体夹层内通37℃以下的温水，融化过程中保持血浆温度全程不超过4℃，反应得到融化的混合血浆；（2）、组分I的制作与离心，调节混合血浆pH值到7.00~7.40，并保持混合血浆温度‑2.5~‑3.5℃，加入乙醇并调节乙醇的体积浓度至8%，调节离子强度至0.15，之后对其进行离心，保持离心全程混合血浆温度保持在‑2.5~‑3.5℃，得到组分I沉淀和组分I上清液；（3）、组分II+III的制作和压滤，取组分I上清液，调节pH值至6.85~6.95，保持组分I上清液温度‑4.5~‑5.5℃，加入乙醇并调节乙醇的体积浓度至20%，调节离子强度至0.14，得到组分II+III反应液；取组分II+III反应液按28g/L血浆的量添加硅藻土并搅拌30分钟以上，之后对组分II+III反应液进行压滤，压滤过程中保持过滤压力小于等于2.0Kg/cm²,得到组分II+III沉淀和组分II+III上清液；（4）、组分IV的制作和压滤，取组分II+III上清液连续进行组分IV‑1和IV‑4制作，按照108.1ml/L的比例加入冷注射用水，调节pH值至5.10~5.20，保持组分II+III上清液温度为‑4.5~‑5.5℃，加入乙醇并调节乙醇的体积浓度至18%，调节离子强度至0.13，静置6小时以上，使组分II+III上清液中产生组分IV‑1沉淀；调节pH值至5.95~6.05，温度为‑4.5~‑5.5℃，加入乙醇并调节乙醇的体积浓度至40%，调节离子强度至0.10，静置8小时以上，之后继续向组分II+III上清液中按21g/L血浆的量添加硅藻土，搅拌30分钟以上对其进行压滤，压滤过程中保持过滤压力小于等于2.0Kg/cm²，得到组分IV上清液和组分IV‑1沉淀与组分IV‑4沉淀混合形成的组分IV沉淀；（5）、组分V的制作和压滤，取组分IV上清液，调节pH值至4.75~4.85，保持组分IV上清液温度为‑9~‑11℃，加入乙醇并调节乙醇的体积浓度至40%，调节离子强度至0.09，静置3小时以上；之后进行压滤，压滤过程中保持过滤压力小于等于2.0Kg/cm²，得到组分V上清液和组分V沉淀；（6）、组分V沉淀溶解过滤，取组分V沉淀加4~5倍沉淀量的注射用水进行溶解，溶解过程中保持温度为1~3℃，之后对反应液进行澄清过滤，得到组分V溶解过滤液；（7）、超滤透析浓缩，超滤透析浓缩过程中调节pH值至5.5~6.0，调节氯化钠浓度至1.5~2%，并连续进行8次透析，其每次透析的组分V溶解液温度依次为2℃、3℃、5℃、9℃、17℃、25℃、25℃、25℃、25℃、25℃，其每次透析的透析水体积为等倍的组分V浓缩液体积，得到人血白蛋白原液；（8）、配制、巴氏灭活、除菌灌装、孵放、检定，取人血白蛋白原液加入注射用水调节蛋白含量19.5~20.5%，加入辛酸钠并调节辛酸钠含量至0.140~0.180mmol/L，加入氯化钠调节钠离子含量至130~160mmol/L,调节pH值至6.6~7.0，之后对人血白蛋白原液进行巴氏灭活，巴氏灭活过程中保持人血白蛋白原液温度为60±0.5℃持续10小时，之后进行过滤除菌，得到人血白蛋白半成品；然后对人血白蛋白半成品进行无菌灌装和孵放，孵放过程保持温度30~32℃，至少孵放14天，最后对产品进行二次灯检，合格品即为人血白蛋白成品；最后将人血白蛋白成品包装入库。