[发明专利]一种拉科酰胺化学酶法制备方法

摘要

本发明属于生物化工技术领域，具体涉及一种拉科酰胺化学酶法制备方法。该方法以消旋2-氨基-3-甲氧基丙酰胺为原料，将具有D型酰胺水解酶活性的湿菌体或粗酶液，或者具有D型酰胺水解酶活性和酰胺消旋酶活性的混合湿菌体或混合粗酶液与消旋2-氨基-3-甲氧基丙酰胺溶液混合，一定温度、pH下进行酶转化反应，酶转化后产物为（R）-2-氨基-3-甲氧基丙酸，（R）-2-氨基-3-甲氧基丙酸乙酰化后在DCC催化下与苄胺缩合成终产物拉科酰胺。本发明技术路线具有制备工艺简洁、反应条件温和、收率高、成本低和产品光学纯度高的优点。

主权项

一种拉科酰胺化学酶法制备方法，其特征是由以下步骤构成：（1）具有D型酰胺水解酶活性的苍白杆菌CICC10363或NCCB10026在培养基中培养产生含有D型酰胺水解酶的湿菌体或具有酰胺消旋酶活性的无色杆菌CICC10400在培养基中培养产生含有酰胺消旋酶的湿菌体；（2）将含有D型酰胺水解酶的湿菌或者粗酶液与一定浓度的消旋2‑氨基‑3‑甲氧基丙酰胺混合，再加入表面活性剂，在25～55℃，pH6～11条件下进行酶促反应1～5h，反应产物为（R）‑2‑氨基‑3‑甲氧基丙酸和（S）‑2‑氨基‑3‑甲氧基丙酰胺混合物或将含有D型酰胺水解酶的湿菌体或者粗酶液与含有酰胺消旋酶的湿菌体或粗酶液按照1:0.5～1:1.5重量比混合，再将上述混合湿菌体或者混合粗酶液与一定浓度的消旋2‑氨基‑3‑甲氧基丙酰胺混合，再加入表面活性剂，在25～55℃，pH6～11条件下进行酶促反应1～10h，反应产物为（R）‑2‑氨基‑3‑甲氧基丙酸；（3）（R）‑2‑氨基‑3‑甲氧基丙酸在碱性条件下与酰化试剂反应，产物为（R）‑2‑乙酰氨基‑3‑甲氧基丙酸；（4）（R）‑2‑乙酰氨基‑3‑甲氧基丙酸在缩合催化剂作用下，与苄胺缩合生成（R）‑2‑乙酰氨基‑N‑苄基‑3‑甲氧基丙酰胺，即拉科酰胺。