[发明专利]一种有活性的金鱼Tgf2转座子重组转座酶蛋白的表达方法

摘要

本发明涉及一种有活性的金鱼Tgf2转座子重组转座酶蛋白的表达方法。具体地，构建了包含金鱼Tgf2转座子的gfTP1转座酶读码框的表达载体，转入大肠杆菌Rosetta1(DE3)后，培养表达菌株至菌液在OD₆₀₀下的吸光度达到0.3-0.4，加入IPTG，在21-22℃下150-200rpm震荡培养，诱导表达出可溶性的重组蛋白，并纯化获得了有功能活性的转座酶。本发明的诱导表达条件使得重组转座酶蛋白的表达量显著升高，取得了预料不到的技术效果，通过斑马鱼的转基因实验，证实了诱导表达的转座酶可获得良好的转座效果。本发明为鱼类及其它脊椎动物转基因和基因组插入提供一种高效的方法。

主权项

一种金鱼gfTP1转座酶蛋白表达质粒，其特征在于，所述的表达质粒是通过以下方法构建的：将SEQ ID NO.5所示的核苷酸序列插入到pET‑28a的BamHI 和 XhoI位点之间。