[发明专利]一种罗非鱼源无乳链球菌毒力弱化方法有效
| 申请号： | 201410087094.0 | 申请日： | 2014-04-18 |
| 公开（公告）号： | CN103881959A | 公开（公告）日： | 2014-06-25 |
| 发明（设计）人： | 李莉萍;王瑞;陈明;甘西;梁万文;黄婷;朱佳杰;雷爱莹;李健;陈福艳 | 申请（专利权）人： | 广西壮族自治区水产科学研究院 |
| 主分类号： | C12N1/36 | 分类号： | C12N1/36;C12R1/46 |
| 代理公司： | 广西南宁明智专利商标代理有限责任公司 45106 | 代理人： | 黎明天 |
| 地址： | 530021 广*** | 国省代码： | 广西;45 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种罗非鱼源无乳链球菌毒力弱化方法，将分离保存的野生菌株在血平板划线培养，挑单菌落于TSB培养基25℃振荡培养；步骤1：培养6h后接种于新TSB培养基25℃振荡培养，6h传一代传至20代；步骤2：取第20代培养物接种于新LTSB培养基35℃振荡培养，6h传一代传至40代；取第41代重复操作步骤1至60代；取第61代重复操作步骤2至80代；按照上述方法持续传代，在传代过程中对菌株的毒力进行测定，传代直至确定菌株毒力弱化。本发明具有简单快速的特点，应用该方法对罗非鱼源无乳链球菌野生菌株毒力弱化获得的弱毒株毒力弱、不易返毒，该方法为罗非鱼链球菌病弱毒疫苗的开发具有重要意义和应用价值。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 罗非鱼 源无乳 链球菌 毒力 弱化 方法 | ||
【主权项】：
一种罗非鱼源无乳链球菌毒力弱化方法，其特征在于采用温差传代快速培养法，即首先将分离保存的野生毒株在血平板上划线培养细菌，挑单菌落于胰豆蛋白胨液体培养基TSB培养；步骤1：培养6 h后接种于新TSB培养基25 ℃振荡培养，6 h传一代传至20代；步骤2：取第20代培养物接种于低营养胰豆蛋白胨液体培养基LTSB 35 ℃振荡培养，6 h传一代传至40代；取第41代重复操作步骤1直至传代至60代；取第61代重复操作步骤2直至传代至80代；按照上述方法持续进行传代，在传代过程中对菌株的毒力进行测定，传代直至确定菌株毒力弱化。
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