[发明专利]结合CXCR4的人类抗体及其用途

摘要

本披露提供了以高亲和力与CXCR4特异地结合的分离的单克隆抗体，尤其是人类单克隆抗体。还提供了对本披露的抗体进行编码的核酸分子、表达载体、宿主细胞、以及用于表达本披露的抗体的方法。还提供了免疫偶联物、双特异性分子以及包括本披露的抗体的药物组合物。本披露还提供了用于检测CXCR4的方法，以及使用本披露的一种抗‑CXCR4抗体治疗不同癌症、炎性病症以及HIV感染的方法。 1

主权项

1.一种单克隆抗体，其与细胞表面上表达的人类CXCR4特异性结合，并包含：

(a)包括SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列的重链可变区CDR1；包括SEQ ID NO:5所示的氨基酸序列的重链可变区CDR2；包括SEQ ID NO:9所示的氨基酸序列的重链可变区CDR3；包括SEQ ID NO:13所示的氨基酸序列的轻链可变区CDR1；包括SEQ ID NO:17所示的氨基酸序列的轻链可变区CDR2；以及包括SEQ ID NO:21所示的氨基酸序列的轻链可变区CDR3；或者

(b)包括SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列的重链可变区CDR1；包括SEQ ID NO:6所示的氨基酸序列的重链可变区CDR2；包括SEQ ID NO:10所示的氨基酸序列的重链可变区CDR3；包括SEQ ID NO:14所示的氨基酸序列的轻链可变区CDR1；包括SEQ ID NO:18所示的氨基酸序列的轻链可变区CDR2；以及包括SEQ ID NO:22所示的氨基酸序列的轻链可变区CDR3。

2.如权利要求1所述的单克隆抗体，其包含：包括SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列的重链可变区CDR1；包括SEQ ID NO:5所示的氨基酸序列的重链可变区CDR2；包括SEQ ID NO:9所示的氨基酸序列的重链可变区CDR3；包括SEQ ID NO:13所示的氨基酸序列的轻链可变区CDR1；包括SEQ ID NO:17所示的氨基酸序列的轻链可变区CDR2；以及包括SEQ ID NO:21所示的氨基酸序列的轻链可变区CDR3。

3.如权利要求1所述的单克隆抗体，其包含：

(a)包括SEQ ID NO:25或41所示的氨基酸序列的重链可变区和包括SEQ ID NO:29或45所示的氨基酸序列的轻链可变区；或者

(b)包括SEQ ID NO:26或42所示的氨基酸序列的重链可变区和包括SEQ ID NO:30或46所示的氨基酸序列的轻链可变区。

4.如权利要求3所述的单克隆抗体，其包含包括SEQ ID NO:25所示的氨基酸序列的重链可变区和包括SEQ ID NO:29所示的氨基酸序列的轻链可变区。

5.如权利要求1‑4中任一项所述的单克隆抗体，其为IgG1或IgG4同种型。

6.如权利要求1‑4中任一项所述的单克隆抗体，其抑制SDF‑1与人类CXCR4的结合。

7.如权利要求1‑4中任一项所述的单克隆抗体，其抑制在表达人类CXCR4的细胞中SDF‑1诱导的钙流动。

8.如权利要求1‑4中任一项所述的单克隆抗体，其抑制SDF‑1诱导的表达人类CXCR4的细胞的迁移。

9.如权利要求1‑4中任一项所述的单克隆抗体，其抑制由人脐静脉内皮细胞形成毛细管。

10.如权利要求1‑4中任一项所述的单克隆抗体，其抑制CXCR4阳性肿瘤细胞的转移。

11.如权利要求1‑4中任一项所述的单克隆抗体，其增加携带CXCR4阳性的肿瘤的受试者的存活时间。

12.如权利要求1‑4中任一项所述的单克隆抗体，其以50nM或更小的EC₅₀抑制SDF‑1与人类CXCR4的结合。

13.如权利要求12所述的单克隆抗体，其以3nM或更小的EC₅₀抑制在表达人类CXCR4的细胞中的SDF‑1诱导的钙流动。

14.如权利要求1‑4中任一项所述的单克隆抗体，其以50nM或更小的EC₅₀抑制SDF‑1诱导的表达人类CXCR4的细胞的迁移。

15.如权利要求1‑4中任一项所述的单克隆抗体，其

(a)抑制SDF‑1与人类CXCR4的结合；

(b)抑制在表达人类CXCR4的细胞中SDF‑1诱导的钙流动；

(c)抑制SDF‑1诱导的表达人类CXCR4的细胞的迁移；和

(d)抑制由人脐静脉内皮细胞形成毛细管。

16.如权利要求15所述的单克隆抗体，其以50nM或更小的EC₅₀抑制SDF‑1与人类CXCR4的结合。

17.如权利要求15所述的单克隆抗体，其以3nM或更小的EC₅₀抑制在表达人类CXCR4的细胞中的SDF‑1诱导的钙流动。

18.如权利要求15所述的单克隆抗体，其以50nM或更小的EC₅₀抑制SDF‑1诱导的表达人类CXCR4的细胞的迁移。

19.如权利要求1‑4中任一项所述的单克隆抗体，其中所述单克隆抗体是嵌合、人源化或人抗体。

20.如权利要求1‑4中任一项所述的单克隆抗体，其中所述单克隆抗体是全长抗体。

21.如权利要求1‑4中任一项所述的单克隆抗体，其中所述单克隆抗体是二价F(ab')₂片段。

22.一种组合物，包括如前述权利要求中任一项所述的单克隆抗体，以及药学上可接受的载体。

23.一种免疫偶联物，包括连接至治疗剂的如权利要求1‑21中任一项所述的单克隆抗体。

24.如权利要求23所述的免疫偶联物，其中所述治疗剂是细胞毒素或放射性同位素。

25.一种组合物，包含如权利要求23或24所述的免疫偶联物以及药学上可接受的载体。

26.一种双特异性分子，包含如权利要求1‑21中任一项所述的单克隆抗体，其连接至具有不同于所述单克隆抗体的结合特异性的第二功能部分。

27.一种组合物，包含如权利要求26所述的双特异性分子以及药学上可接受的载体。

28.一种分离的核酸，该核酸对如权利要求1‑21中任一项所述的单克隆抗体进行编码。

29.一种表达载体，包括如权利要求28所述的核酸。

30.一种宿主细胞，包括如权利要求29所述的表达载体。

31.用于制备抗‑CXCR4抗体的方法，该方法包括在如权利要求30所述的宿主细胞中表达该抗体，并且从该宿主细胞中分离该抗体。

32.一种体外调节表达CXCR4受体的细胞中的CXCR4活性的方法，该方法包括用如权利要求1‑21中任一项所述的单克隆抗体接触该细胞，使得该细胞中的CXCR4活性得到调节。

33.如权利要求32所述的方法，其中所述细胞是表达CXCR4的肿瘤细胞，并且该方法导致对该肿瘤细胞生长的抑制或对该肿瘤细胞转移的抑制。

34.如权利要求32所述的方法，其中所述细胞是表达CXCR4的T细胞，并且该方法导致对HIV进入该细胞的抑制。

35.如权利要求32所述的方法，其中所述细胞是处于炎性病症的淋巴细胞，并且该方法导致对炎症的抑制作用。

36.如权利要求32所述的方法，其中所述细胞参与血管化作用，并且该方法导致对血管发生的调节作用。

37.权利要求1‑21中任一项所述的单克隆抗体在制备用于调节受试者的细胞中的CXCR4活性的药物组合物中的用途。

38.一种用于调节受试者的细胞中的CXCR4活性的药物组合物，其包含如权利要求1‑21中任一项所述的单克隆抗体。

39.权利要求1‑21中任一项所述的单克隆抗体在制备用于在受试者中抑制肿瘤细胞的生长或转移的药