[发明专利]一种用于ATP检测的方法及其配套的光学适配子传感器

摘要

本发明公开了一种用于ATP检测的方法及其配套的光学适配子传感器。将完整的ATP适配子被分成单链DNA，即S1和S2。S1被固定在带孔DNA结合板表面；S2和用于产生信号的核酸链S3被固定在以PNS/AuNPs纳米复合物为信号放大载体的表面，在被检测物ATP存在时，S1和S2通过ATP分子而连接，从而将信号放大载体固定在带孔DNA结合板表面，然后负载在PNS/AuNPs纳米复合物表面的S3与加入的钾离子和血红素形成四链体结构DNA酶，催化底物，得到可用于检测的光学信号。本发明具有很高的灵敏度和特异性，对ATP的响应范围为0.01–1nmol·L^-1，检测限为1.35pmol·L^-1。

主权项

一种用于ATP检测的方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)将设计合成的含巯基的寡肽自组装成寡肽纳米球；(2)将制备的金纳米粒子通过Au–S键固定到寡肽纳米球的表面，得到用于信号放大的PNS/AuNPs纳米复合物载体；(3)将用于产生信号的核酸链S3和ATP单链适配体S2固定到PNS/AuNPs纳米复合物上，ATP单链适配体S1固定在带孔DNA结合板上，板表面空隙位置用牛血清蛋白封闭；(4)通过加入不同浓度的ATP分子将负载有S3和S2的PNS/AuNPs纳米复合物连接到带孔DNA结合板上；(5)往上述带孔DNA结合板中加入钾离子和血红素后，PNS/AuNPs纳米复合物表面的S3与钾离子和血红素形成四链体结构的DNA酶，从而可催化底物反应得到具有光学信号产物；（6）制作标准曲线后，用于检测ATP样品。