[发明专利]一种耐盐碱速生白榆离体快速繁殖方法

摘要

本发明公开了一种耐盐碱速生白榆离体快速繁殖方法。它包括白榆无性系外植体的采集、消毒、接种和继代培养，接种和继代培养的条件是：在本发明研发的EM培养基中进行，培养温度为白天（或光照条件下）25℃±2℃，夜间（或黑暗条件下）18℃±2℃，光照时间为每天12小时，湿度90%以上。采用本发明的培养基和方法，白榆无菌苗平均高增殖率提高5倍以上，平均增殖系数提高2.3倍以上。

主权项

一种耐盐碱速生白榆离体快速繁殖方法，其特征是，（1）白榆无性系外植体的采集：选取耐盐碱速生白榆的幼嫩组织或器官，低温保鲜状态下带回实验室；（2）外植体消毒：对白榆无性系外植体进行修剪，保留芽与生长点；然后进行清洗和消毒；（3）外植体接种：将带有生长点或芽的白榆无性系外植体切下1‑2cm一段，置于EM培养基中培养；培养温度为白天或光照条件下25℃±2℃，夜间或黑暗条件下18℃±2℃；光照时间为每天12小时；湿度为90%以上；1‑2周后生长点或芽萌发，形成叶片组织，获得无菌苗；（4）继代培养：将获得的无菌苗切分为单芽、茎段或者丛生芽备用；然后在EM培养基中继代培养，培养温度为白天或光照条件下25℃±2℃，夜间或黑暗条件下18℃±2℃；光照时间为每天12小时；湿度为90%以上，继代培养周期为3‑4周；所述EM培养基，包括以下含量的各种组分：CaCl₂·2H₂O441mg/L，NH₄NO₃1600mg/L，KNO₃2022mg/L，NaCl907mg/L，MgSO₄3361mg/L，NaH₂PO₄·2H₂O312mg/L，K₂SO₄350mg/L，Na₂SO₄300mg/L，CaCl₂230mg/L，CoCl₂·6H₂O0.24mg/L，CuSO₄·5H₂O0.375mg/L，H₃BO₃9.3mg/L，MnSO₄·H₂O16.9mg/L，Na₂MoO₄·2H₂O0.25mg/L，ZnSO₄·7H₂O11.5mg/L，KI0.83mg/L，FeSO₄·7H₂O27.8mg/L，Na₂EDTA·2H₂O37.25mg/L，肌醇108mg/L，甘氨酸3.75mg/L，烟酸5mg/L，V61.2mg/L，V113.5mg/L，生物素0.2mg/L，叶酸0.88mg/L，维生素C1.76mg/L，核黄素1.9mg/L。