[发明专利]一种测定灯盏花素片中野黄芩苷含量的方法

摘要

本发明公开了一种测定灯盏花素片中野黄芩苷含量的方法，该方法主要包括以下步骤：（1）灯盏花素片供试品溶液的制备；（2）灯盏花素片供试品溶液的¹H-NMR检测；（3）灯盏花素片供试品溶液中野黄芩苷的¹H-NMR结构解析及定量峰的选择；（4）灯盏花素片中野黄芩苷的定量分析，本发明建立的灯盏花素片中野黄芩苷含量的测定方法不仅具有简单快速、专属性强、重现性好等优点，而且无需被测化合物的对照品即可实现准确定量，可以弥补现有标准和其他定量方法的不足，可应用于灯盏花素片的质量控制。

主权项

一种测定灯盏花素片中野黄芩苷含量的方法，其特征是包括以下步骤：（1）灯盏花素片供试品溶液的制备取灯盏花素片，粉碎，取粉末20.0mg，精密称定，置于2mL的量瓶中，加入氘代二甲基亚砜溶解并定容至刻度，精密移取1mL上述溶液置于2mL的量瓶中，加入1mL浓度为0.1mg/mL的3‑三甲基硅基丙酸钠‑d₄的重水定容至刻度，混匀，14000rpm离心10分钟，取上清液，作为灯盏花素片供试品溶液；（2）灯盏花素片供试品溶液的¹H‑NMR检测取0.6mL步骤（1）所得的灯盏花素片供试品溶液，转移至5mm核磁管中密封，将核磁管置于核磁共振仪中，按以下条件进行¹H‑NMR检测：抑水峰序列zgcppr，观测频率600.23MHz，测定温度297.7K，谱宽12335.5Hz，90°脉冲宽度13μs，数据采样点65536，扫描次数16次，延迟时间15s，接受增益203，得到灯盏花素片供试品溶液的¹H‑NMR谱图；（3）灯盏花素片供试品溶液中野黄芩苷的¹H‑NMR结构解析及定量峰的选择根据灯盏花素片供试品溶液的¹H‑NMR谱图，对其化学位移和耦合常数进行归属，解析化合物为野黄芩苷，具体为δ7.93:2H,d,J=9Hz,H‑2′,6′；δ6.98:3H,m,H‑8,3',5'；δ6.82:1H,s,H‑3；δ5.22:1H,d,J=7.2Hz,H‑1″；δ4.03:1H,d,J=9.6Hz,H‑5″；选取其中无干扰的质子信号峰1H或2H或3H作为野黄芩苷的定量峰；或选取其中无干扰的质子信号峰1H和2H，或1H和3H，或2H和3H作为野黄芩苷的定量峰；或同时选取其中无干扰的质子信号峰1H、2H和3H作为野黄芩苷的定量峰，其中质子信号峰1H、2H、3H的化学位移δ分别为6.82、7.93、6.98ppm；（4）灯盏花素片中野黄芩苷的定量分析按步骤（1）制备灯盏花素片供试品溶液，按步骤（2）进行¹H‑NMR检测，按步骤（3）所选定的定量峰采用内标法计算灯盏花素片中野黄芩苷的含量。