[发明专利]革兰阳性菌实时荧光定量PCR检测试剂盒

摘要

本发明提供一种革兰阳性菌的实时荧光定量PCR检测试剂盒，由革兰阳性菌DNA抽提液、定量PCR反应液、标准品、阳性对照品、阴性对照品、说明书和盒体组成，其中定量PCR反应液含有PCR缓冲液、MgCl₂、dNTPs、耐热DNA聚合酶、上游扩增引物、下游扩增引物和革兰阳性菌荧光探针。本发明以革兰阳性菌16SrRNA基因为靶基因开发的实时荧光定量PCR试剂盒，能简便、快速、通用检测所有革兰阳性菌，并能对检测结果阳性的革兰阳性菌进行准确定量，提高了革兰阳性菌鉴定检测的通用性和敏感性，可为临床所有革兰阳性菌感染的早期诊断提供依据。

主权项

一种革兰阳性菌实时荧光定量PCR检测试剂盒，由革兰阳性菌DNA抽提液（1）、定量PCR反应液（2）、标准品（3）、阳性对照品（4）、阴性对照品（5）、说明书（6）和盒体（7）组成，定量PCR反应液单管分装，矩阵排列，其中定量PCR反应液含有PCR缓冲液、MgCl₂、dNTPs、耐热DNA聚合酶、上游扩增引物、下游扩增引物和革兰阳性菌荧光探针； PCR扩增引物序列为：上游扩增引物：5’‑CAACGCGAAGAACCTTACC‑3’；下游扩增引物：5’‑ACGTCATCCCCACCTTCC‑3’；革兰阳性菌荧光探针：5’‑FAM‑TGACGACAACCATGCACCACC‑BHQ‑1‑3’；标准品序列为：CAACGCGAAG AACCTTACCA AATCTTGACA TCCTTTGACA ACTCTAGAGA TAGAGCCTTC CTCTTCGGGG GACAAAGTGA CAGGTGGTGC ATGGTTGTCG TCAGCTCGTG TCGTGAGATG TTGGGTTAAG TCCCGCAACG AGCGCAACCC TTAAGCTTAG TTGCCATCAT TAAGTTGGGC  ACTCTAAGTT GACTGCCGGT GACAAACCGG AGGAAGGTGG GGATGACGT。