[发明专利]一种快速检测皂苷含量的方法

摘要

本发明提供一种快速检测皂苷含量的方法，采用衰减全反射-紫外可见光谱仪测量柱层析过程中上样流出液、水洗流出液、洗脱液等多种液体的光谱图，用化学计量学方法建立皂苷含量和光谱图的定量模型，在分析待测样品时，直接扫描未知浓度层析流出液的紫外-可见光光谱图，然后将光谱图数据输入定量模型中，计算得到层析流出液中的皂苷含量值。该方法简单快速，无污染，样品不需要稀释或者过滤，可用于柱层析过程不同流出液中皂苷含量的快速测定，有助于监控柱层析过程，提高过程质量控制水平。

主权项

一种快速检测皂苷含量的方法，通过以下步骤实现： （1）测定层析过程流出液校正集样本中的皂苷含量 采用高效液相色谱法测定层析过程中上样流出液、水洗流出液和乙醇洗脱液校正集样本的皂苷含量；色谱条件：色谱柱为Waters ACQUITY CSH C₁₈，50 mm×2.1 mm i.d. ，1.7 µm；流动相：0.01﹪甲酸水（A）‑0.01﹪甲酸乙腈（B）；线性梯度洗脱程序：0 min 19﹪（B），6 min 20﹪ （B），8.5 min 31﹪ （B），11 min 33﹪ （B），17 min 90﹪（B）；运行19 min；流速：0.35 ml/min；检测波长：203 nm；柱温：40 ℃；进样量：5 µl，按外标两点法方程计算含量；（2）紫外扫描得到校正集样本的紫外‑可见光谱图 取层析过程中获取的上样流出液、水洗流出液和洗脱液样品，直接用衰减全反射‑紫外可见光谱仪进行扫描，扫描的光谱区间是190nm～800nm，分辨率为0.1nm‑1nm，光谱扫描三次之后，取平均值作为校正集样本；（3）采用偏最小二乘法或者主成分回归法分别对上样和水洗流出液、乙醇洗脱液构建定量模型 使用Simca、Unscrambler或者Minitab软件处理数据，在构建光谱图和皂苷含量定量模型时使用的方法是偏最小二乘法或者主成分回归法，使用交叉验证法确定最佳主成分数，当定量模型的相关系数到0.9以上时，认为模型已经建立完成；（4）层析过程流出液中皂苷含量的快速测定 将光纤探头装于层析柱出口管路，直接扫描未知浓度的层析过程流出液的光谱图，层析过程流出液包括上样流出液、水洗流出液和洗脱液，紫外扫描的光谱范围和分辨率要求和建立标准集样本时相同，将光谱数据代入构建的定量模型中，作为预测集，得到层析过程流出液中皂苷的含量。