[发明专利]GL和TCM199作为牛精液稀释液和冷冻液的配制方法及使用方法

摘要

本发明公开了一种GL和TCM199作为牛精液稀释液和冷冻液的配制方法及使用方法，该GL和TCM199作为牛精液稀释液和冷冻液的配制方法包括牛精液稀释液的配制和牛精液冷冻液的配制；该GL和TCM199作为牛精液稀释液和冷冻液的使用方法包括以下步骤牛精液稀释液的配制和牛精液冷冻液的配制；采精；初次稀释；二次稀释；冷冻保存。本发明提高了牛冷冻精液的解冻活力，提高了牛人工授精受胎率，降低了牛精液稀释液的粘度、减小牛精液稀释液的颗粒；简化了操作，适用于各类规模生产条件使用，提高了各种规模的牛精液冷冻的标准化和实用化水平和牛细管冻精的解冻活力，降低了解冻精子的畸形率和提高了牛人工授精的受胎率。

主权项

一种GL和TCM199作为牛精液稀释液和冷冻液的配制方法，其特征在于，该GL和TCM199作为牛精液稀释液和冷冻液的配制方法包括：牛精液稀释液的配制和牛精液冷冻液的配制；牛精液稀释液的配制方法包括以下步骤：用电子天平称取TCM199 2克、三羟甲基氨基甲烷40克、柠檬酸20克、丙酮酸钠0.1克、果糖5克、80万单位青霉素钠1克；将TCM199、三羟甲基氨基甲烷、柠檬酸、丙酮酸钠、果糖和80万单位青霉素钠装入1000毫升容量瓶中，加入双蒸水500毫升摇动溶解，待全部固形物溶解后再用双蒸水定容到1000毫升；将定容好的牛精液稀释液进行过滤分装，分装玻璃瓶必须事先高压灭菌，分装量为100毫升～200毫升；牛精液冷冻液的配制方法包括以下步骤：冷冻液分为第一液和第二液，第一液直接稀释鲜精，第二液用于精液平衡；第一液配制方法：准确抽取牛精液稀释液25毫升，将其注入100ml烧杯中，再抽取精制卵黄5毫升和甘油0.5毫升，一并加入盛有25ml牛精液稀释液的烧杯中，用玻璃棒逆时针搅动2分钟，静置备用；第二液配制方法：准确抽取牛精液稀释液25毫升，将其注入100ml烧杯中，再抽取精制卵黄5毫升和甘油3毫升，一并加入盛有25ml牛精液稀释液的烧杯中，用玻璃棒逆时针搅动2分钟，静置备用；该GL和TCM199作为牛精液稀释液和冷冻液的的使用方法包括以下步骤：第一步，首先用电子天平称取TCM199 2克、三羟甲基氨基甲烷40克、柠檬酸20克、丙酮酸钠0.1克、果糖5克、80万单位青霉素钠1克；将TCM199、三羟甲基氨基甲烷、柠檬酸、丙酮酸钠、果糖和80万单位青霉素钠装入1000毫升容量瓶中，加入双蒸水500毫升摇动溶解，待全部固形物溶解后再用双蒸水定容到1000毫升；将定容好的牛精液稀释液进行过滤分装，分装玻璃瓶必须事先高压灭菌，分装量为100毫升～200毫升，依使用量和使用频率确定配制牛精液稀释液；第二步，按照冷冻液分为第一液和第二液，第一液直接稀释鲜精，第二液用于精液平衡；第一液配制方法：牛精液稀释液25毫升、精制卵黄5毫升、甘油0.5毫升；第二液配制方法：牛精液稀释液25毫升、精制卵黄5毫升、甘油3毫升；第三步，采精，采集健康公牛的新鲜精液；第四步，初次稀释，将已经预热到35℃的第一液按照采精量2.5倍稀释，保温箱保存或储运1小时～2小时；第五步，二次稀释，将第二液预热到35℃，加入与初次稀释时第一液同样剂量的第二液到等温的初次稀释精液中，混匀后立即装管制成细管精液，细管精液在4℃冷藏箱平衡1.5小时后进行冷冻保存；第六步，冷冻保存：将平衡好的细管精液用程序化冷冻仪进行冷冻，冷冻结束后抽检并移入液氮罐中进行保存和使用。