[发明专利]用于重组蛋白质的改进的收获操作有效
| 申请号: | 201380027623.1 | 申请日: | 2013-03-14 |
| 公开(公告)号: | CN104350156B | 公开(公告)日: | 2019-04-02 |
| 发明(设计)人: | M·W·莱尔德;R·圣约翰;J·V·甘森;K·凯尔艾斯;D·纳达拉贾;R·亚当斯;B·R·斯内德克 | 申请(专利权)人: | 弗·哈夫曼-拉罗切有限公司 |
| 主分类号: | C12P21/00 | 分类号: | C12P21/00 |
| 代理公司: | 北京市中咨律师事务所 11247 | 代理人: | 黄革生;刘金辉 |
| 地址: | 瑞士*** | 国省代码: | 瑞士;CH |
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| 摘要: | 本发明涉及产生重组蛋白质的方法,其包括发酵原核宿主细胞,其中已经用编码所述重组蛋白质的核酸转化所述原核宿主细胞,在dO2水平大于0%的条件下收获所述重组蛋白质,将所述重组蛋白质纯化成的经过滤的储备物,其中通过如IEC测定法在310nm处所测量,所述经过滤的储备物不含有可检测的DHNA‑重组蛋白质加合物。此外,还提供产生重组蛋白质的方法,其包括发酵缺失menE基因的原核宿主细胞,其中已经用编码所述重组蛋白质的核酸转化所述原核宿主细胞,收获所述重组蛋白质,将所述重组蛋白质纯化成经过滤的储备物,其中如通过IEC测定法在310nm处所测量,所述经过滤的储备物不含可检测的DHNA‑重组蛋白质加合物,其中将重组蛋白质产量增加约20%或者更多。 | ||
| 搜索关键词: | 用于 重组 蛋白质 改进 收获 操作 | ||
【主权项】:
1.产生重组蛋白质的方法,其包括(a)发酵缺失menE基因的原核宿主细胞,其中已经用编码所述重组蛋白质的核酸转化所述原核宿主细胞,其中所述原核宿主细胞是大肠杆菌(Escherichia coli),和(b)收获所述重组蛋白质,以及(c)将所述重组蛋白质纯化成用于储存的经过滤的储备物,其中所述用于储存的经过滤的储备物不含可检测的1,4‑二羟基‑2‑萘甲酸(DHNA)‑重组蛋白质加合物。
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