[发明专利]重组系统有效
| 申请号： | 201380024895.6 | 申请日： | 2013-03-12 |
| 公开（公告）号： | CN104603273B | 公开（公告）日： | 2019-09-10 |
| 发明（设计）人： | 诺尔·尼克拉斯·玛利亚·伊丽莎白·佩吉·范;马帝那·贝舒森;伊万内·约翰内斯·奥迪利亚·亚伦德森 | 申请（专利权）人： | 帝斯曼知识产权资产管理有限公司 |
| 主分类号： | C12N15/63 | 分类号： | C12N15/63;C12N15/90;C12N15/00;C12N5/00 |
| 代理公司： | 北京东方亿思知识产权代理有限责任公司 11258 | 代理人： | 肖善强 |
| 地址： | 荷兰*** | 国省代码： | 荷兰;NL |
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| 摘要： | 本发明涉及在靶位点进行重组的方法，该方法包括：提供两种或更多种核酸，它们总共包含：(a)能够与靶位点侧翼序列同源重组的序列；(b)两个或更多个位点特异性重组位点；(c)编码识别位点特异性重组位点的重组酶的序列；和(d)编码标记的序列，其中所述两种或更多种核酸能够相互同源重组从而产生单一核酸，并且其中所述两种或更多种核酸中的至少两种各包含编码无功能的部分标记的序列；以及使所述两种或更多种核酸相互重组以及与靶位点的侧翼序列重组，以在靶位点插入编码有功能标记的连续核酸序列和编码重组酶的序列，所述编码标记和/或重组酶的序列的侧翼是至少两个位点特异性重组位点以及所述位点特异性重组位点的侧翼是能够与靶位点的侧翼序列同源重组的序列。 | ||
| 搜索关键词： | 重组 系统 | ||
【主权项】：
1.在靶位点实施重组以使所述靶位点的现存序列缺失的方法，其中所述方法包括：‑提供两种或更多种核酸，它们合在一起成为组时总共包含：(a)能够与靶位点的侧翼序列同源重组的序列；(b)两个或更多个位点特异性重组位点；(c)编码识别所述位点特异性重组位点的重组酶的序列；和(d)编码标记的序列，其中所述两种或更多种核酸能够相互同源重组以产生单一核酸，和其中所述两种或更多种核酸中的至少两种各包含编码无功能的部分标记的序列；和‑使所述两种或更多种核酸相互重组和与靶位点的侧翼序列重组，以在靶位点插入编码有功能标记的连续核酸序列、编码重组酶的序列和至少两个位点特异性重组位点，所述编码标记和/或编码重组酶的序列的侧翼是至少两个位点特异性重组位点，以及所述位点特异性重组位点的侧翼是能够与靶位点的侧翼序列同源重组的序列，其中在真菌细胞体内实施所述核酸的相互重组和与靶位点的侧翼序列的重组，所述方法还包括：‑表达所述重组酶以使位于所述位点特异性重组位点之间的序列被外重组，其中在体内实施所述位点特异性重组位点之间的核酸序列的外重组，其中：所述位点特异性重组位点是lox位点，以及所述重组酶是Cre；所述位点特异性重组位点是FRT位点，以及所述重组酶是Flp；所述重组位点是Vlox位点，以及所述重组酶是VCre；或者所述重组位点是Slox，以及所述重组酶是SCre。
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