[发明专利]一种在昆虫细胞sf9中表达hABCC2的方法在审
| 申请号： | 201310752196.5 | 申请日： | 2013-12-31 |
| 公开（公告）号： | CN104745633A | 公开（公告）日： | 2015-07-01 |
| 发明（设计）人： | 谢伟胜;张科之 | 申请（专利权）人： | 苏州杰诺曼博生物科技有限公司 |
| 主分类号： | C12N15/866 | 分类号： | C12N15/866;C12N15/12;C07K14/47 |
| 代理公司： | 南京苏科专利代理有限责任公司 32102 | 代理人： | 陆明耀;姚姣阳 |
| 地址： | 215123 江苏省苏州市苏州工*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明涉及一种在昆虫细胞sf9中表达人hABCC2的方法，是将两端分别包含BamHI和HindIII酶切位点的人ABCC2基因克隆入pFastBac1载体的BamHI和HindIII位点，将得到的重组质粒pFastBac1-hABCC2转化DH10Bac大肠杆菌感受态细胞，获得插入hABCC2基因的重组杆状病毒穿梭载体Bacmid-hABCC2，脂质体介导上述重组杆状病毒穿梭载体Bacmid-hABCC2转染sf9昆虫细胞，获得表达hABCC2的重组病毒，进一步培养所述重组病毒，表达hABCC2蛋白。本发明方法为hABCC2蛋白的大量获得提供一条新途径，为hABCC2蛋白的应用开发打下工作基础。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 昆虫 细胞 sf9 表达 habcc2 方法 | ||
【主权项】：
一种在昆虫细胞sf9中表达人hABCC2的方法，其特征在于包括如下步骤:步骤一，人工合成两端分别包含BamHI和HindIII酶切位点的hABCC2基因；步骤二，将hABCC2基因克隆入pFastBac1载体的BamHI/HindIII位点，得到重组质粒pFastBac1‑hABCC2；步骤三，将重组质粒pFastBac1‑hABCC2转化DH10Bac大肠杆菌感受态细胞，与其中的杆状病毒穿梭载体Bacmid重组，获得插入hABCC2基因的重组杆状病毒穿梭载体Bacmid‑hABCC2；步骤四，脂质体介导重组杆状病毒穿梭载体Bacmid‑hABCC2转染sf9昆虫细胞，获高滴度的hABCC2的重组病毒；步骤五，hABCC2的重组病毒感染SF9昆虫细胞，大量表达hABCC2蛋白。
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