[发明专利]荧光检测仪

摘要

本发明提供一种荧光检测仪，包括激光合束模块、共焦扫描模块、光谱成像模块、荧光显微镜和控制显示模块；激光合束模块包括两个近红外光连续激光器、激光准直镜、反射镜和合束镜；共焦扫描模块包括可相互切换的三个二色镜、三个滤光片、扫描振镜、扫描透镜、针孔透镜和针孔；光谱成像模块包括分光棱镜、聚焦镜、三个狭缝及三个光电倍增管；荧光显微镜包括全反射棱镜、筒镜、显微物镜、纳米位移台和样品台；控制显示模块用于对激光器、扫描振镜、光电倍增管和纳米位移台进行控制及对图像进行显示；所述荧光检测仪可突破现有技术检测深度低的缺点，实现厘米级的荧光检测，可同时实现荧光定位和组分分析两种功能，在活体荧光检测领域有广阔应用前景。

主权项

一种荧光检测仪，其特征在于，包括：激光合束模块，其包括分别出射第一路近红外激光和第二路近红外激光的第一近红外连续激光器和第二近红外连续激光器、分别对所述第一路近红外激光和所述第二路近红外激光进行准直的第一激光准直器和第二激光准直器、对所述第一路近红外激光进行反射的反射镜及对所述第一路近红外激光与/或所述第二路近红外激光进行合束的合束镜；共焦扫描模块，其包括第一二色镜、第二二色镜、第三二色镜、第一滤光片、第二滤光片、第三滤光片、扫描振镜、扫描透镜、针孔透镜及针孔，所述第一二色镜、所述第二二色镜及所述第三二色镜与所述第一滤光片、所述第二滤光片及所述第三滤光片一一对应；光谱成像模块，其包括分光棱镜、聚焦镜、第一狭缝、第二狭缝、第三狭缝、第一光电倍增管、第二光电倍增管及第三光电倍增管；荧光显微镜，其包括全反射棱镜、筒镜、显微物镜、纳米位移台和用于放置样品且设置于所述纳米位移台的样品台；用于对所述第一近红外连续激光器、所述第二近红外连续激光器、所述扫描振镜、所述第一光电倍增管、所述第二光电倍增管、所述第三光电倍增管和所述纳米位移台进行控制以及对图像进行显示的控制显示模块；及用于将经过所述针孔的荧光汇聚准直至所述分光棱镜的准直透镜，其设置于所述针孔和所述分光棱镜之间；所述第一二色镜、所述第二二色镜及所述第三二色镜与所述第一滤光片、所述第二滤光片及所述第三滤光片根据所述第一近红外连续激光器和所述第二近红外连续激光器的开启，由所述控制显示模块控制切换至三个不同的工作状态；第一种工作状态时，所述第一二色镜和所述第一滤光片处于所述第一路近红外激光的光路中，所述第一路近红外激光通过所述第一激光准直镜准直为平行光束后，经所述反射镜和所述合束镜后入射到所述第一二色镜，被所述第一二色镜反射到所述扫描振镜形成扫描光束，经过所述扫描透镜、所述全反射棱镜、所述筒镜和所述显微物镜后聚焦到样品上一点；样品激发出的荧光经过相同光路返回至所述第一二色镜，由所述第一二色镜透射后经所述第一滤光片滤除反射杂光后，经过所述针孔透镜聚焦到所述针孔；经过所述准直透镜后汇聚准直至所述分光棱镜，经所述分光棱镜光谱分光后，经所述聚焦镜聚焦并射向所述第一狭缝；需要检测的波段范围内的荧光被所述第一狭缝透射后进入所述第一光电倍增管，其他波段的荧光被反射到所述第二光电倍增管与/或所述第三光电倍增管；射向所述第二狭缝的荧光中，需要检测的波段范围内的荧光被透射后进入到所述第二光电倍增管；射向所述第三狭缝的荧光中，需要检测的波段范围内的荧光被透射后进入到所述第三光电倍增管；所述第一光电倍增管、所述第二光电倍增管和所述第三光电倍增管将接收到的荧光信号转换为电信号并进行放大，经过积分放大电路后进行采集；第二种工作状态时，所述第二二色镜和所述第二滤光片处于所述第二路近红外激光的光路中，所述第二路近红外激光通过所述第二激光准直镜准直为平行光束后，经所述反射镜和所述合束镜后入射到所述第二二色镜，被所述第二二色镜反射到所述扫描振镜形成扫描光束，经过所述扫描透镜、所述全反射棱镜、所述筒镜和所述显微物镜后聚焦到样品上一点；样品激发出的荧光经过相同光路返回至所述第二二色镜，由所述第二二色镜透射后经所述第二滤光片滤除反射杂光后，经过所述针孔透镜聚焦到所述针孔；经过所述准直透镜后汇聚准直至所述分光棱镜，经所述分光棱镜光谱分光后，经所述聚焦镜聚焦并射向所述第一狭缝；需要检测的波段范围内的荧光被所述第一狭缝透射后进入到所述第一光电倍增管，其他波段的荧光被反射到所述第二光电倍增管与/或所述第三光电倍增管；射向所述第二狭缝的荧光中，需要检测的波段范围内的荧光被透射后进入到所述第二光电倍增管；射向所述第三狭缝的荧光中，需要检测的波段范围内的荧光被透射后进入到所述第三光电倍增管；所述第一光电倍增管、所述第二光电倍增管和所述第三光电倍增管将接收到的荧光信号转换为电信号并进行放大，经过积分放大电路后进行采集；第三种工作状态时，所述第三二色镜和所述第三滤光片处于所述第一路近红外激光和所述第二路近红外激光的光路中，所述第一路近红外激光通过所述第一激光准直镜准直为平行光束后射向所述反射镜，并被反射至所述合束镜，所述第二路近红外激光通过所述第二激光准直器准直为平行光束后射向所述合束镜，所述第一路近红外激光和所述第二路近红外激光经所述合束镜后入射到所述第三二色镜，被所述第三二色镜反射到所述扫描振镜形成扫描光束，经过所述扫描透镜、所述全反射棱镜、所述筒镜和所述显微物镜后聚焦到样品上；样品激发出的荧光经过相同光路返回至所述第三二色镜，由所述第三二色镜透射后经所述第三滤光片滤除反射杂光后，经过所述针孔透镜聚焦到所述针孔；经过所述准直透镜后汇聚准直至所述分光棱镜，经所述分光棱镜光谱分光后，经所述聚焦镜聚焦并射向所述第一狭缝；需要检测的波段范围内的荧光被所述第一狭缝透射后进入到所述第一光电倍增管，其他波段的荧光被反射到所述第二光电倍增管与/或所述第三光电倍增管；射向所述第二狭缝的荧光中，需要检测的波段范围内的荧光被透射后进入到所述第二光电倍增管；射向所述第三狭缝的荧光中，需要检测的波段范围内的荧光被透射后进入到所述第三光电倍增管；所述第一光电倍增管、所述第二光电倍增管和所述第三光电倍增管将接收到的荧光信号转换为电信号并进行放大，经过积分放大电路后进行采集。