[发明专利]一种获得瑟伯氏棉五个抗病相关基因cDNA全长的方法无效
| 申请号： | 201310731988.4 | 申请日： | 2013-12-27 |
| 公开（公告）号： | CN103710358A | 公开（公告）日： | 2014-04-09 |
| 发明（设计）人： | 房卫平;赵付安;谢德意;李武;杨晓杰;赵元明;吕淑平;唐中杰;聂利红 | 申请（专利权）人： | 河南省农业科学院经济作物研究所 |
| 主分类号： | C12N15/29 | 分类号： | C12N15/29;C12N15/10 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 450002 *** | 国省代码： | 河南;41 |
| 权利要求书： | 查看更多 | 说明书： | 查看更多 |
| 摘要： | 本发明公开了一种获得瑟伯氏棉五个抗病相关基因cDNA全长的方法，包括以下步骤：培育瑟伯氏棉幼苗，制备黄萎病菌孢子悬液；培养钵中接菌诱导，取瑟伯氏棉幼根，提取RNA，合成cDNA第一链；利用瑟伯氏棉近缘物种雷蒙地棉PGIP等基因的EST序列，进行序列延伸，设计特异引物完成电子克隆；瑟伯氏棉PGIP等基因EST的PCR扩增、回收，连接在pGEM-T Easy Vector上，将PGIP等基因片段转化到感受态细胞DH5α；RACE法克隆cDNA全长，基因组DNA的PCR扩增及回收，纯化目的片段；PGIP等基因的Real Time PCR，序列分析。本发明提供了一种获得瑟伯氏棉五个抗病相关基因cDNA全长的方法，获得了瑟伯氏棉5个抗黄萎病相关基因cDNA全长，为今后克隆野生植物基因提供了一套行之有效的技术路线，具有重要的应用价值。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 获得 瑟伯氏棉 五个 抗病 相关 基因 cdna 全长 方法 | ||
【主权项】：
一种获得瑟伯氏棉五个抗病相关基因cDNA全长的方法，其特征在于，该方法包括以下步骤：培育瑟伯氏棉幼苗，制备黄萎病菌孢子悬液；培养钵中接菌诱导，取瑟伯氏棉幼根，提取RNA，合成cDNA第一链；利用瑟伯氏棉近缘物种雷蒙地棉PGIP基因的EST序列，进行序列延伸，设计特异引物完成电子克隆；瑟伯氏棉PGIP基因EST的PCR扩增、回收，连接在pGEM‑T Easy Vector上，将PGIP基因片段转化到感受态细胞DH5α；RACE法克隆cDNA全长，基因组DNA的PCR扩增及回收，纯化目的片段；PGIP基因的Real Time PCR，序列分析。
下载完整专利技术内容需要扣除积分，VIP会员可以免费下载。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息，商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于河南省农业科学院经济作物研究所，未经河南省农业科学院经济作物研究所许可，擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作，请联系【客服】
本文链接：http://www.vipzhuanli.com/patent/201310731988.4/，转载请声明来源钻瓜专利网。
