[发明专利]一种β-酪蛋白单克隆抗体的制备方法和β-酪蛋白胶体金检测试纸条及其制备方法无效
| 申请号： | 201310710647.9 | 申请日： | 2013-12-20 |
| 公开（公告）号： | CN103864929A | 公开（公告）日： | 2014-06-18 |
| 发明（设计）人： | 周坚;王黎丽 | 申请（专利权）人： | 长沙安迪生物科技有限公司 |
| 主分类号： | C07K16/18 | 分类号： | C07K16/18;G01N33/68;G01N33/531 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 410205 湖南*** | 国省代码： | 湖南;43 |
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| 摘要： | 本发明涉及生物技术领域，提供一种β-酪蛋白单克隆抗体的制备方法和β-酪蛋白胶体金检测试纸条及其制备方法，技术方案为：将β-酪蛋白作为抗原免疫BALB/c小鼠，取免疫效果最佳的小鼠脾细胞与骨髓瘤细胞SP2/0进行融合，以β-酪蛋白、αs1-酪蛋白和κ-酪蛋白作为检测抗原，通过酶联免疫吸附试验检测杂交瘤细胞的上清进行筛选，保留阳性孔，用有限稀释法进行克隆化，得到能稳定分泌抗β-酪蛋白的单克隆抗体的杂交瘤细胞株后大量制备和纯化所得的单克隆抗体。所述方法所获得的β-酪蛋白单克隆抗体经胶体金标记后可吸附于金标结合垫上，制备成胶体金检测试纸条。本发明对原料乳酪蛋白含量是否达标实现快速特异性检测，分辨率高，缩短检测时间。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 蛋白 单克隆抗体 制备 方法 胶体 检测 试纸 及其 | ||
【主权项】：
一种β‑酪蛋白单克隆抗体的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：a.动物免疫注射：将β‑酪蛋白作为抗原免疫Balb/c小鼠，进行免疫以及加强免疫；b.制备杂交瘤细胞：取免疫效果最佳的小鼠脾细胞与骨髓瘤细胞SP2/0进行融合，以β‑酪蛋白、αs1‑酪蛋白和κ‑酪蛋白作为检测抗原，通过酶联免疫吸附试验检测杂交瘤细胞的上清进行筛选，保留阳性孔，经过亚克隆获得能稳定分泌抗β‑酪蛋白的单克隆抗体的杂交瘤细胞株后；c.对小鼠腹腔注射杂交瘤细胞，采集腹水以及对腹水纯化获得β‑酪蛋白单克隆抗体。
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