[发明专利]一株产纳豆激酶的地衣芽胞杆菌工程菌和用该菌生产纳豆激酶的方法在审
申请号: | 201310562366.3 | 申请日: | 2013-11-12 |
公开(公告)号: | CN104630124A | 公开(公告)日: | 2015-05-20 |
发明(设计)人: | 陈守文;周银华;魏雪团;陈敬帮;祁高富;冀志霞 | 申请(专利权)人: | 华中农业大学 |
主分类号: | C12N1/21 | 分类号: | C12N1/21;C12N15/75;C12N9/56;C12R1/10 |
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地址: | 430070 湖*** | 国省代码: | 湖北;42 |
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摘要: | 一株产纳豆激酶的地衣芽胞杆菌工程菌和用该菌生产纳豆激酶的方法,属于微生物基因工程和酶工程技术领域。本发明通过PCR技术扩增获得枯草芽胞杆菌MBS04-6的纳豆激酶基因,利用地衣芽胞杆菌BL10作为表达宿主,以枯草芽胞杆菌168的启动子P43为启动子,以地衣芽胞杆菌WX-02的胞外丝氨酸蛋白酶Vpr的信号肽为信号肽,以地衣芽胞杆菌WX-02的α-淀粉酶的终止子序列为终止子,将这些表达元件与穿梭载体pHY300PLK连接,构成表达载体,转化地衣芽胞杆菌BL10,即为产纳豆激酶的地衣芽胞杆菌工程菌BL10(pP43SNT),该菌株于2013年9月10日保存于中国典型培养物保藏中心(CCTCC),保藏编号为CCTCC NO:M2013401。本发明还提供了该菌株生产纳豆激酶的方法,在液体发酵培养基中最大酶活力达到11.37FU/mL。 | ||
搜索关键词: | 一株产纳豆 激酶 地衣 杆菌 工程 生产 方法 | ||
【主权项】:
一株产纳豆激酶的地衣芽胞杆菌工程菌,保藏编号为CCTCC NO:M2013401,其特征在于,将分泌表达载体pP43SNT导入表达宿主地衣芽胞杆菌BL10,获得具有纳豆激酶表达活性的工程菌BL10(pP43SNT)。
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