[发明专利]外源线粒体导入到哺乳动物细胞中的方法有效

专利信息
申请号: 201310554218.7 申请日: 2013-11-08
公开(公告)号: CN104630149B 公开(公告)日: 2018-08-21
发明(设计)人: 刘兴国;裴端卿;刘景磊;刘雪宾 申请(专利权)人: 中国科学院广州生物医药与健康研究院
主分类号: C12N5/10 分类号: C12N5/10;C12N15/85;C12N5/071
代理公司: 广州华进联合专利商标代理有限公司 44224 代理人: 万志香;曾凤云
地址: 510663 广东省*** 国省代码: 广东;44
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摘要: 发明公开一种将外源DNA导入到线粒体或线粒体空壳中得到的人工合成线粒体,再将人工合成线粒体,通过内吞作用,进入哺乳动物细胞,得到含有外源线粒体的细胞,实现了外源线粒体在细胞内发挥有效功能。本发明导入后的人工合成线粒体DNA基因能够稳定表达,并可有效传代。本发明所述的外源线粒体导入到细胞中的方法,可作为全新的线粒体分子克隆方法,在线粒体中实现基因敲除,基因敲入,基因重排等,从而实现针对哺乳动物线粒体DNA的任意分子克隆改造,对线粒体DNA突变的疾病治疗有重要意义。
搜索关键词: 线粒体 外源 哺乳动物细胞 线粒体DNA 分子克隆 细胞 线粒体DNA突变 外源DNA导入 传代 哺乳动物 基因敲除 基因重排 疾病治疗 稳定表达 有效功能 重要意义 基因 空壳 改造
【主权项】:
1.含有外源线粒体的哺乳动物细胞,所述细胞具有内吞功能,所述细胞是巨噬细胞;所述外源线粒体是通过将外源DNA导入到线粒体空壳中得到的人工合成线粒体;所述外源线粒体中基因在哺乳动物细胞中稳定表达,并有效传代;所述外源DNA为野生型C57BL/6J小鼠的线粒体DNA序列中的5328位点插入有GFP基因和SEQ.ID No.1所示D Linker的序列的含GFP‑COX‑I融合基因的环状线粒体DNA。
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