[发明专利]卡巴胆碱及其杂质含量的液相色谱检测方法

摘要

本发明公开了一种卡巴胆碱原料药、卡巴胆碱制剂中卡巴胆碱及杂质含量的高效液相色谱检测方法，采用亲水相互作用色谱体系进行分离，采用蒸发光散射、示差折光检测器或者质谱检测器进行检测，按外标法以峰面积的常用对数值与进样量的常用对数值作线性回归计算样品中卡巴胆碱及其杂质的含量。本发明的检测方法能够将卡巴胆碱及在卡巴胆碱原料产品中或者卡巴胆碱制剂中所含杂质如氯化胆碱和氯化乙酰胆碱有效分离，从而实现精确测定卡巴胆碱原料药与制剂中卡巴胆碱的含量及其杂质的含量，灵敏度高、重现性良好，适用于卡巴胆碱原料药、卡巴胆碱注射液、卡巴胆碱滴眼液、卡巴胆碱眼内注射溶液的质量控制。

主权项

卡巴胆碱及其杂质含量的液相色谱检测方法，包括下述步骤：（1）对照品溶液制备取对照品加体积比50‑90:10‑50的乙腈‑水溶液或甲醇‑水溶液配制成每1ml含0.1‑1.5mg的溶液，摇匀过滤，取续滤液作为对照品溶液；所述对照品为卡巴胆碱、氯化胆碱和氯化乙酰胆碱； （2）供试品溶液制备取供试品适量，加体积比50‑90:10‑50的乙腈‑水溶液或甲醇‑水溶液配制成每1ml含0.1‑1.5mg卡巴胆碱的溶液，摇匀过滤，取续滤液作为供试品溶液；所述供试品为卡巴胆碱原料药或者含卡巴胆碱的制剂；（3）液相色谱分离采用亲水相互作用色谱体系对卡巴胆碱及其杂质进行色谱分离；采用蒸发光散射、示差检测器或者质谱检测器进行检测；色谱条件如下：色谱柱：氨基、氰基、二醇基、酰胺基或磺酸基键合的硅胶色谱柱，或者非键合的硅胶色谱柱；色谱柱内径2‑8 mm，色谱柱长度50‑300 mm，填充物粒径1.5‑10 μm；流动相：甲醇和/或乙腈与有机弱酸盐水溶液的混合溶液，有机弱酸盐水溶液的浓度为5‑60 mmol/L；流速：1.0±0.5 ml/min；柱温：30± 15 ℃；（4）浓度计算方法和检测限按外标法以峰面积的常用对数值与进样量μg的常用对数值作线性回归计算样品中卡巴胆碱及其杂质的含量。