[发明专利]一种猪繁殖与呼吸综合征复合灭活疫苗的制备方法

摘要

一种猪繁殖与呼吸综合征复合灭活疫苗的制备方法，属于兽用生物制品技术领域。其包括以下步骤：1）种细胞的培养；2）制苗用细胞的悬浮培养；3）病毒的培养与收获；4）猪繁殖与呼吸综合征复合灭活疫苗制备。采用本方法制备疫苗，其特点是可以缩短生产周期，降低人员配置，污染几率低，占地面积小，所制备的病毒滴度高，所制备的疫苗批间差异小，产品质量稳定高效，副反应小，可全面提高疫苗质量。

主权项

一种猪繁殖与呼吸综合征复合灭活疫苗的制备方法，其特征在于包括以下工艺步骤：1）种细胞的培养：用细胞生长液培养种子细胞；2）制苗用细胞的悬浮培养：将步骤1）中培养好的种子细胞悬液接种至已验证的灌注袋中，吸附后在激流灌注式生物反应器中加入细胞生长液进行培养；3）病毒的培养与收获：当细胞培养4～6天，将蓝耳病病毒CH‑1a株悬液接种于激流灌注式生物反应器中，换用维持液进行培养，接毒后实时监测糖耗情况，当糖耗接近0时，即开始收获病毒，收获病毒后，反复冻融灌注袋，收获全悬病毒液，测定毒价；4）猪繁殖与呼吸综合征复合灭活疫苗制备：将步骤3）中得到的病毒液进行无菌检验、病毒含量测定，检验合格后进行甲醛灭活，灭活检验合格后，在每1000ml灭活检验合格的猪繁殖与呼吸综合征病毒抗原液中加入1～2份免疫增强剂混合均匀，然后与桑米特家畜水包油包水佐剂按3:2（V:V）进行乳化分装制成猪繁殖与呼吸综合征复合灭活疫苗。