[发明专利]基于细胞状态反馈的三维细胞支架打印方法

摘要

本发明公开了一种基于细胞状态反馈的三维细胞支架打印方法，该方法采用在细胞液培养时加入标记物，从而达到实时跟踪细胞分布的目的，在支架材料制作的过程中，混合用于检测成细胞分泌物的试液，达到实时检测干细胞分化进程的目的。通过细胞追踪及细胞分化过程的实时检测，可以对装载细胞的凝胶沉积进行实时的监控，从而方便研究细胞成活和分化与沉积技术各参数（如沉积速度，压电脉冲宽度等）直接的关系，大大缩短了研究周期和成本。

主权项

一种基于细胞状态反馈的三维细胞支架打印方法，其特征在于，包括：（1）将干细胞置于活体染料的培养皿中培养染色，直至干细胞变色后，将有色干细胞和无色干细胞分离，取出有色干细胞；（2）将染色后的有色干细胞置于凝胶原液中培养，培养完成后，加入凝胶浴液，过滤得到凝胶包裹的干细胞；（3）将步骤（2）得到凝胶包裹的干细胞装入三维打印装置的注射器中，进行三维细胞支架打印，打印过程中，根据有色干细胞的分布情况实时读取三维细胞支架上有色干细胞的分布信息，最后固化得到三维细胞支架；（4）将得到的三维细胞支架放置20‑48小时后，浸入到干细胞初期分化检测试剂中，检测三维细胞支架上干细胞初期分化信息；（5）将得到的三维细胞支架放置10‑15天，利用蛋白检测设备检测三维细胞支架上干细胞后期分化信息；（6）最后进行如下判断：若制备得到三维细胞支架符合要求，则完成打印过程；若制备得到三维细胞支架不符合要求，则将步骤（3）得到的三维细胞支架上有色干细胞的分布信息、步骤（4）得到的三维细胞支架上干细胞初期分化信息、以及步骤（5）得到的三维细胞支架上干细胞后期分化信息作为反馈信息，调整步骤（3）中三维打印装置打印参数，重复步骤（1）‑（6）。