[发明专利]一种无激素的玉米愈伤组织再生方法

摘要

本发明公开一种无激素的玉米愈伤组织再生方法。将长势良好、呈颗粒状的玉米愈伤组织培养在无激素的胚状体诱导培养基上，于24～26℃培养20～23天，诱导产生胚状体；将胚状体转接到无激素的再生培养基上，培养温度为24～26℃，光照度为12000～18000lux，每天的光照时间为16h，培养至生出根和芽，得到再生植株；将再生植株于如下条件下继续培养6～7天进行壮苗即可：26～28℃、24000～30000lux，每天光照时间为16h。本发明通过改变蔗糖用量来调控再生培养阶段的渗透压，从而实现愈伤组织的高效再生，全程不需要植物激素。这一方法不但节约了实验成本，而且避免了长期使用激素对组织材料的毒害。

主权项

一种无激素的玉米愈伤组织再生方法，其特征在于包含如下步骤：（1）将长势良好、呈颗粒状的玉米愈伤组织培养在胚状体诱导培养基上，于24～26℃培养20～23天，诱导产生胚状体；（2）将步骤（1）得到的胚状体转接到无激素的再生培养基上，培养温度为24～26℃，光照度为12000～18000lux，每天的光照时间为16h，培养至生出根和芽，得到再生植株；（3）将步骤（2）得到再生植株于如下条件下继续培养6～7天进行壮苗即可：26～28℃、24000～30000lux，每天的光照时间为16h；步骤（1）中所述的胚状体诱导培养基的成分如下：MS大量元素+MS微量元素+肌醇250mg/L+盐酸硫胺素3.5mg/L+烟酸吡哆醇1.0mg/L+烟酸0.5mg/L+甘氨酸4.0mg/L+蔗糖40～80g/L+脯氨酸300mg/L+水解酪蛋白100mg/L+MES500mg/L+植物凝胶2500mg/L，pH值为5.8；步骤（2）中所述的无激素的再生培养基的成分如下：MS大量元素+MS微量元素+肌醇250mg/L+盐酸硫胺素3.5mg/L+烟酸吡哆醇1.0mg/L+烟酸0.5mg/L+甘氨酸4.0mg/L+蔗糖20～40g/L+MES500mg/L+植物凝胶2500mg/L，pH值为5.8。