[发明专利]一种农药残留的快速检测方法

摘要

本发明提供一种农药残留的快速检测方法，根据荧光素在经过一连串反应后发出荧光的原理，通过设置缓冲液延长并稳定发光时间，通过检测发光强度，将检测到的数值放入公式进行计算，抑制率大于或者等于50%，样品中所含农药超标；抑制率小于50%，样品合格；本发明操作简便，排除了吸光检测方法因为色素沉积造成的检测不准确的缺陷，将检测的灵敏度提高至1ppb，且重复操作误差小，本发明在同等资源条件下最大限度的发挥了其实用价值，值得推广和应用。

主权项

一种农药残留的快速检测方法，其特征在于：包括以下步骤：a、准备实验试剂：    荧光素：1‑3mg荧光素粉剂加3‑10ml水溶解制成溶液，再按溶液重量50倍加纯净水稀释制成荧光素溶液，分装后在‑20℃以下冷冻保存备用；    荧光素酶：2‑5mg荧光素酶加5‑15ml水溶解制成溶液，再按溶液重量50倍纯净水稀释制的荧光素酶溶液，分装后在‑20℃以下冷冻保存备用；    ATP：取1‑5mmol/L标准的ATP溶液，或者取ATP粉剂用纯净水稀释到该浓度备用；缓冲液：通过常量天平按照3‑6份HEPES、2‑5份EDTA和8‑12份醋酸镁加入10‑15份纯净水定容，过滤除菌制成缓冲溶液，包装在4℃保存备用；b、样品提取液制备：选取待检验的蔬菜样品，冲洗掉表面泥土，剪成 0.8‑1.2cm2碎片，取样品1g，放入烧杯或提取瓶中，加入3‑15mL所述缓冲溶液，振荡1min‑2min，除去样品沉渣制得提取液，静置3min‑5min，待用；c、 样品检测：保持检测温度在25℃，在酶标板空白对照孔位加入200ul所述缓冲溶液，样品孔位中倒入200ul所述提取液，再在缓冲溶液和提取液中分别加入10‑30ul荧光素酶溶液，10‑30ul所述荧光素溶液，5‑15ulATP溶液，反应后通过检测仪器检测发光强度，记录空白的发光强度I0，样品发光强度Ix，按照抑制率(%)=[(I0一Ix)/I0] ×100%从而计算出抑制率；d、 结果判断：抑制率大于或者等于50%，样品中所含农药超标；抑制率小于50%，样品合格。