[发明专利]一种益生菌超低温冷冻工艺及其在益生菌制剂中的应用

摘要

本发明公开了一种益生菌超低温冷冻工艺、适合这种工艺的全盐冷冻保护剂配方及其制备的益生菌超低温冷冻颗粒。所述益生菌超低温冷冻工艺包括以下步骤（1）配制发酵培养基；（2）培养益生菌；（3）离心处理；（4）配制保护剂；（5）添加保护剂；（6）速冻成型。本发明还提供了利用所述益生菌超低温冷冻颗粒制备的益生菌制剂及其制备方法。本发明所述益生菌超低温冷冻颗粒为益生菌冷冻菌株，其不需要干燥除水，具有冷冻速度快、活菌率高、复水性能好等优点。本发明所述益生菌超低温冷冻颗粒本身含水，能更快速的溶解于溶液中，并且可以避免常规低温冷冻干燥菌粉复水时对益生菌细胞的损伤，可以大大提高益生菌制剂的活菌含量水平。

主权项

一种益生菌超低温冷冻颗粒的制备方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：(1)配制发酵培养基：以重量百分比计，培养基中各组分配比为乳糖1‑2％、葡萄糖1‑2％、蛋白胨0.5‑2％、酵母膏1‑5％、柠檬酸氢二铵0.2‑1％、K2HPO4 0.01‑0.5％、无水乙酸钠0.1‑0.5％、硫酸镁0.02‑0.1％，余量为蒸馏水，调节pH为6.0‑7.0，配好后灭菌，备用；(2)培养益生菌：将益生菌菌株按照5‑10％的接种量接入步骤(1)所得的培养基中，在温度30‑40℃、转速40‑100rpm下培养10‑20小时，然后在10‑20℃放置2‑6小时，得到益生菌发酵液，备用；(3)离心处理：将步骤(2)所得益生菌发酵液在4‑10℃，流量为150ml‑3000ml/min条件下，进行管道式离心，得到益生菌菌泥，备用；(4)配制保护剂：以重量百分比计，保护剂中各组分的配比为磷酸氢二钾1‑2％、磷酸二氢钾1‑2％、半胱氨酸盐酸盐1‑3％、甘油1‑2％、乳清粉1‑5％、余量为蒸馏水，配好后灭菌，备用；(5)添加保护剂：将步骤(3)所得益生菌菌泥与步骤(4)所得保护剂按重量比1:1‑3混合，搅拌均匀形成乳化液；(6)速冻成型：将步骤(5)所得乳化液，按照500g/min的速度喷雾入‑195℃液氮中速冻3min，形成均匀的低温小颗粒，得到益生菌超低温冷冻颗粒。