[发明专利]一种高效快速繁殖金线莲组培苗的方法

摘要

本发明属于生物技术领域，具体涉及到一种高效快速繁殖铁皮石斛组培苗的方法。具体包括：将各个阶段的激素浓度调整为最适浓度，然后将铁皮石斛种子在种子培养基中培养形成原球茎并进一步形成小芽，接着把铁皮石斛小芽转接于继代培养基中培养成具有2～3片真叶并带有1～2条幼根的小苗，再小苗转移到一步成苗培养基中培养成具有2～3条根、4片叶片、株高≥2.5cm、茎粗≥0.2cm的商品组培苗，最后将商品组培苗移栽至大棚内苗床上的基质中并培养至可采收。通过实施本发明，种子萌发时间短及萌发率高，芽苗生产快、污染低、变异少，商品组培苗粗壮、叶面展开、根系发达；从而实现铁皮石斛种苗快速无毒繁育的目的。

主权项

一种高效快速繁殖金线莲组培苗的方法，其特征包括以下步骤：(1)将金线莲蒴果顶部用刀片切割一小部分，用清水清洗一遍表面，放置于组培瓶中，然后在无菌操作台中先用酒精浸泡30s，接着用氯化汞水溶液浸泡8min，最后用无菌水反复漂洗3～5次后即可完成消毒步骤；(2)将步骤(1)中得到金线莲种子放置于无菌的铝片上，用手术刀切开后播种于种子培养基中，在25±3℃、湿度≤60％、光照强度1000Lux‑1500Lux、光照时间为10h/d的培养室中培养，培养1个月后种子萌发形成原球茎并进一步形成小芽；其中，上述的种子培养基组成为：+6‑卡基嘌呤2.5mg/L～3mg/L+萘乙酸0.5mg/L～1mg/L+白糖30g/L+土豆200g/L+琼脂5.1g/L；(3)将步骤(2)得到的金线莲小芽转接于继代培养基中，在25±3℃、湿度≤60％、光照强度3000Lux‑3500Lux、光照时间为11h/d的培养室中培养，1个月后小芽变成具有1～2片真叶并带有1～2条幼根的小苗；其中，上述中继代培养基组成为：MS+6‑卡基嘌呤3.5mg/L～4mg/L+萘乙酸0.5mg/L～1mg/L+白糖30g/L+土豆200/L+琼脂5.1g/L；(4)将步骤(3)中得到的小苗转移到一步成苗培养基中，在25±3℃、湿度≤60％、光照强度3000Lux‑3500Lux、光照时间为12h/d的培养室中培养，1个月后小苗长成具有3～4条根、3～4片叶、株高≥2.5cm、茎粗≥0.2cm的商品组培苗；其中，上述中一步成苗培养基组成为：+6‑卡基嘌呤0.5mg/L～1mg/L+萘乙酸2.5mg/L～3mg/L+白糖20g/L+土豆200g/L+琼脂5.1g/L。