[发明专利]枯草芽孢杆菌Jaas ed1无细胞滤液胞外合成纳米银粒子的方法

摘要

本发明公开了一种枯草芽孢杆菌Jaas ed1无细胞滤液胞外合成纳米银粒子的方法，包括以下步骤：1)枯草芽孢杆菌Jaas ed1无细胞滤液的制备，其中包括一次振荡培养、一次离心处理、收集菌体、二次振荡培养、二次离心处理；2)纳米银粒子的合成与表征。本发明采用枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)Jaas ed1无细胞滤液，通过胞外合成纳米银粒子。经紫外/可见光分光光度计全波长扫描(UV-vis)、透射电子显微镜扫描(TEM)、X射线粉末衍射分析(XRD)、傅里叶变换红外光谱分析(FT-IR)等方法验证所合成的纳米银粒子粒度在20～50nm之间，形态均一，分散性较好。因此本发明条件温和，既简便快捷，又经济环保，所用试剂环境友好，为纳米银的绿色合成提供了一种新的思路。

主权项

一种枯草芽孢杆菌Jaas ed1无细胞滤液胞外合成纳米银粒子的方法，包括以下步骤：1)枯草芽孢杆菌Jaas ed1无细胞滤液的制备：一次振荡培养：将枯草芽孢杆菌Jaas ed1放入装有100毫升LB培养基的摇瓶中，30℃振荡培养，振荡培养转速为150转/分钟，时间为12‑24个小时，获得枯草芽孢杆菌Jaas ed1培养液；一次离心处理：将经过振荡培养的枯草芽孢杆菌Jaas ed1培养液进行离心处理，离心转速为5000转/分钟，时间为15‑30分钟；收集菌体：将经过一次离心处理的枯草芽孢杆菌Jaas ed1培养液中的菌体收集，并将枯草芽孢杆菌Jaas ed1菌体用去离子水荡洗3次，以去除残留的LB培养基；二次振荡培养：将经过上述收集菌体步骤处理后的枯草芽孢杆菌Jaas ed1菌体重悬于100毫升去离子水中，并置于30℃的温度下，二次振荡培养，二次振荡培养的转速为150转/分钟，时间为12‑36个小时，获得枯草芽孢杆菌Jaas ed1菌体悬液；二次离心处理：将上述经过二次振荡处理的枯草芽孢杆菌Jaas ed1菌体悬液进行二次离心处理，二次离心处理的转速为12000转/分钟，时间为15‑30分钟，以将枯草芽孢杆菌Jaas ed1菌体及其碎片与上清液分离；收集上清液：将经过上述二次离心处理后产生的上清液收集，用孔径为0.22μm的滤膜过滤，获得枯草芽孢杆菌Jaas ed1无细胞滤液；2)纳米银粒子的合成与表征：首先，取步骤1)中制得的枯草芽孢杆菌Jaas ed1无细胞滤液100毫升，加入100‑200μl浓度为1mol/L的AgNO3，并在室温放置24‑72个小时；接着进行离心处理，转速为15000转/分钟，时间为30‑60分钟；离心结束后，将沉淀物收集，再将收集的沉淀物用无水乙醇荡洗3次，在60℃的温度下烘干成粉末，制得纳米银粒子。经紫外/可见光分光光度计全波长扫描(UV‑vis)、透射电子显微镜扫描(TEM)、X射线粉末衍射分析(XRD)、傅里叶变换红外光谱分析(FT‑IR)等方法验证所合成的纳米银粒子形态均一，分散性较好。