[发明专利]利用锌指核酸酶敲除绵羊肌肉抑制素基因的方法有效
| 申请号： | 201310159422.9 | 申请日： | 2013-04-26 |
| 公开（公告）号： | CN103290045A | 公开（公告）日： | 2013-09-11 |
| 发明（设计）人： | 刘明军;张雪梅;李文蓉;张宁;贺三刚;刘晨曦;玛依拉 | 申请（专利权）人： | 新疆维吾尔自治区畜牧科学院中国-澳大利亚绵羊育种研究中心 |
| 主分类号： | C12N15/63 | 分类号： | C12N15/63;C12N5/071 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 830000 新疆维吾尔*** | 国省代码： | 新疆;65 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种锌指核酸酶定点删除绵羊肌肉抑制素基因的方法，其针对绵羊Myostatin基因外显子3设计了识别39bp的特异靶位点序列，并构建锌指核酸酶质粒，将该质粒转染绵羊成纤维细胞，获得可以定点删除95bp和113bp的双等位基因删除的单克隆细胞，表明锌指核酸酶定点删除Myostatin基因特异靶位点序列能够准确删除Myostatin基因外显子3并能准确分选出Myostatin基因被定点删除的细胞，证实了该序列的有效性，且获得删除的单克隆细胞无需抗生素筛选，兼顾了基因组靶向修饰和安全性两大优点，对培育无抗性标记基因、安全高效的转基因绵羊具有重要意义。 | ||
| 搜索关键词： | 利用 核酸酶 绵羊 肌肉 抑制 基因 方法 | ||
【主权项】：
一种锌指核酸酶定点删除绵羊肌肉抑制素基因的方法，其根据绵羊肌肉抑制素基因序列，设计ZFNs特异位点表达载体并转入绵羊成纤维细胞中，获得肌肉抑制素基因敲除的细胞，其特征在于，设计特异的锌指核酸酶ZFNs，其作用的DNA序列为：MSTN‑ZFN‑Set1：ATACCCATCTTGTGCACCaagcaaACCCCAAAGGTTCAG。
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