[发明专利]利用铜绿微囊藻测定莠去津生物毒性的方法

摘要

本发明公开了一种利用铜绿微囊藻测定莠去津生物毒性的方法，其步骤包括：A、铜绿微囊藻的培养；B、铜绿微囊藻藻液的制备；C、铜绿微囊藻叶绿素荧光对莠去津生物毒性的响应时间的确定；D、利用铜绿微囊藻叶绿素荧光测定莠去津生物毒性的标准曲线的绘制：取系列浓度莠去津标准液加入到铜绿微囊藻制备液中，充分混合至步骤C确定的“最佳响应时间”后，用荧光光谱仪测定铜绿微囊藻的叶绿素荧光强度；每一浓度设置三个平行样，用灭菌的蒸馏水替代样品设置空白样，计算光合抑制率，最后绘制“莠去津浓度与光合作用抑制率的剂量-效应关系曲线”，作为铜绿微囊藻叶绿素荧光法定量测定莠去津生物毒性的标准曲线。本发明能够简便、快速的测定莠去津的生物毒性，成本低廉，绿色环保。

主权项

1.利用铜绿微囊藻测定莠去津生物毒性的方法，其特征步骤包括：A、铜绿微囊藻的培养：将铜绿微囊藻培养至对数期，备用；B、铜绿微囊藻藻液的制备：用灭菌的蒸馏水对生长至对数期的铜绿微囊藻进行稀释，使其在680nm处的OD值为0.3-0.5，用于进行莠去津生物毒性测定；C、铜绿微囊藻叶绿素荧光对莠去津生物毒性的响应时间的确定：取一定浓度的莠去津溶液1mL加入到铜绿微囊藻制备液中，定容至100mL，震荡使其充分混合，每3min取一次藻液至10mm光程的荧光比色皿中，放入荧光光谱仪中测定铜绿微囊藻的叶绿素荧光强度，绘制铜绿微囊藻叶绿素荧光强度随时间变化的关系曲线，确定铜绿微囊藻叶绿素荧光对莠去津生物毒性的最佳响应时间；D、利用铜绿微囊藻叶绿素荧光测定莠去津生物毒性的标准曲线的绘制：取系列浓度的莠去津标准液加入铜绿微囊藻制备液中，充分混合至步骤C确定的“最佳响应时间”后，用荧光光谱仪测定铜绿微囊藻的叶绿素荧光强度；每一浓度设置三个平行样，用灭菌的蒸馏水替代样品设置一组空白样；按公式1计算光合抑制率，式中：y_i——空白叶绿素荧光强度；y₀——样品叶绿素荧光强度；最后绘制“莠去津浓度与光合作用抑制率的剂量-效应关系曲线”，作为铜绿微囊藻叶绿素荧光法定量测定莠去津生物毒性的标准曲线。