[发明专利]一种选择缓冲液用于蛋白质结晶的方法

摘要

本发明提供了一种选择缓冲液用于蛋白质结晶的方法，首先配制均匀分布的缓冲液溶解蛋白质；然后将结晶试剂与蛋白质溶液或结晶试剂、缓冲液和蛋白质样品混合，制备蛋白质结晶溶液；最后静置于密闭结晶板中直至结晶。本发明选择合适的蛋白质结晶缓冲液的pH条件，使得蛋白质溶解度在一个较宽的区间范围内变化，增加了蛋白质晶体形核的概率，从而提高了结晶效率。

主权项

一种选择缓冲液用于蛋白质结晶的方法，其特征在于包括下述步骤：（a）配制pH区间间隔为0.5pH值，均匀分布于1～14pH值区间内，浓度分别为0.05mol/L，0.1mol/L和1mol/L的81种缓冲液，在蛋白质稳定pH区间范围内，选择一种缓冲液，该缓冲液的pH值距离蛋白质等电点最远，或者随机选择均匀分布于1～14pH区间的缓冲液组合，用这些缓冲液组合溶解蛋白质，分别使所得的蛋白质溶液中蛋白质的终浓度达到1～50mg/ml；（b）将结晶试剂与蛋白质溶液混合按照0.1～10：1体积比例混合，或者是结晶试剂、缓冲液和纯化后的蛋白质样品按照(0.1～10)：(0.1～10)：1混合，制备蛋白质结晶溶液；（c）制备的蛋白质结晶溶液置于密闭结晶板，在0～60℃条件下静置直至结晶。在显微镜下观察，统计出现蛋白质晶体的条件数目。