[发明专利]一种绿花重瓣铁线莲组织培养快繁方法

摘要

本发明提供一种绿花重瓣铁线莲组织培养快繁方法，步骤包括：1)取绿花重瓣铁线莲幼茎的茎尖，在超净台上用无菌水冲洗、75％酒精浸泡处理20～30秒，再用0.1～0.2％升汞浸泡消毒6～10分钟，无菌水冲洗干净后接种到丛芽诱导培养基中进行初代诱导培养；2)将初代诱导培养得到的丛生芽分成单个小芽，接种到丛芽增殖培养基中进行继代培养；3)当芽苗长至2～3cm时接种到壮苗生根培养基中进行生根培养。本发明方法可以快速繁殖绿花重瓣铁线莲，不仅可以节约培育种苗成本、提高生产效率，而且不受外界条件的限制，四季皆可进行，节约育苗占地面积，可在短期内形成大量优良试管苗，进行规模化、工厂化生产。

主权项

一种绿花重瓣铁线莲组织培养快繁方法，其特征在于：包括以下步骤:1) 取绿花重瓣铁线莲幼茎的茎尖，在超净台上用无菌水冲洗、75％酒精浸泡处理20～30秒，再用0.1～0.2％升汞浸泡消毒6～10分钟，无菌水冲洗干净后接种到丛芽诱导培养基中进行初代诱导培养；2)将初代诱导培养得到的丛生芽分成单个小芽,接种到丛芽增殖培养基中进行继代培养；3)当芽苗长至2～3cm时可以接种到壮苗生根培养基中进行生根培养；采用的培养基配方如下：①丛芽诱导培养基：MS + 6‑BA 1.0～2.0 mg/L + NAA 0.02～0.2 mg/L + KT 0.2～0.5 mg/L + 白糖20～30g/L + 土豆50g/L + 琼脂0.3～0.5%，pH5.6～5.8，②丛芽增殖培养基：MS + 6‑BA 2.0～3.0 mg/L + NAA 0.1～0.5 mg/L + KT 0.5～1.0 mg/L + 白糖20～30g/L + 蛋白胨1g/L + 琼脂0.3～0.5%， pH5.6～5.8，③壮苗生根培养基：1/2MS + 0.2～0.5mg/L NAA + 0.2～0.5mg/L IBA + 活性碳0.1% + 白糖20g/L + 蛋白胨1g/L + 琼脂0.3～0.5%， pH5.6～5.8；培养条件如下：①初代诱导培养：温度23℃～25℃，空气湿度60%～65%，光照50～100 lx，8h/d；②继代培养：温度24～26℃，湿度65%～70%，光照强度800～1200lx，光照10h/d；③生根培养：温度25～27℃，湿度65%～70%，光照强度1500～2000lx，光照12h/d。