[发明专利]室温扩增DNA的方法有效
| 申请号： | 201310086850.3 | 申请日： | 2013-03-18 |
| 公开（公告）号： | CN104059905B | 公开（公告）日： | 2020-04-21 |
| 发明（设计）人： | 胡振新 | 申请（专利权）人： | 胡振新 |
| 主分类号： | C12N15/10 | 分类号： | C12N15/10 |
| 代理公司： | 苏州华博知识产权代理有限公司 32232 | 代理人： | 何蔚 |
| 地址： | 201203 上海市浦*** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种室温扩增DNA的方法，包括：（1）提取模板DNA；（2）将模板DNA与扩增试剂混合形成扩增混合液后，进行室温DNA扩增10～60分钟，得到所需的扩增DNA。本发明实现了在常温下DNA的扩增，在资源有限的情况下，使扩增DNA成为可能，并缩短反应时间，得到特异性扩增产物；简化了DNA引物配对以及DNA聚合酶复合物延伸的过程。 | ||
| 搜索关键词： | 室温 扩增 dna 方法 | ||
【主权项】：
一种室温扩增DNA的方法，其特征在于，包括步骤：（1）提取模板DNA；（2）将模板DNA与扩增试剂混合形成扩增混合液后，进行室温DNA扩增10～60分钟，得到所需的扩增DNA；其中，扩增试剂的组分包括：1）10～30mM pH7.2～7.8Tris‑HAc2）20～80mM醋酸钾3）2～5mM醋酸镁4）1～4mM巯基乙醇5）质量百分比为1%～3.5%的聚乙二醇200006）50～100μM dNTPs7）100～500nM引物8）0.5～1mM ATP9）50～100nM真核DNA扩增环状复合物RFC10）100～200nM增殖细胞核抗原PCNA11）50～100nM polδ复合酶或人polη聚合酶12）1～2μM真核DNA复制蛋白A。
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