[发明专利]用于双峰驼线粒体DNA异质性的检测方法无效
| 申请号： | 201310073218.5 | 申请日： | 2013-03-07 |
| 公开（公告）号： | CN103131783A | 公开（公告）日： | 2013-06-05 |
| 发明（设计）人： | 何晓红;马月辉;关伟军;浦亚斌 | 申请（专利权）人： | 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68 |
| 代理公司： | 北京双收知识产权代理有限公司 11241 | 代理人： | 王菲 |
| 地址： | 100193 *** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | 本发明涉及一种用于双峰驼线粒体DNA异质性的检测方法，包括以下步骤：（1）扩增线粒体DNA异质性片段：根据双峰驼线粒体D-loop区序列，在相对保守区域设计一对引物，扩增该重复片度；PCR扩增体系为20μL，反应程序为：95℃预变性5min，94℃变性45s，62℃退火1min，72℃延伸1min，72℃延伸15min，35个循环；（2）DNA测序仪片段分析：经琼脂糖凝胶电泳检测合格后，稀释并上DNA测序仪进行片段分析；GeneMapper软件分析原始数据，进行标准曲线校对和片段分析。本发明的检测方法时间短、灵敏度高、分辨率高（可以区分1bp的差异）、适合大批量检测，可快速、批量进行400bp以内的专用于双峰驼线粒体DNA异质性分析。 | ||
| 搜索关键词： | 用于 双峰驼 线粒体 dna 异质性 检测 方法 | ||
【主权项】：
用于双峰驼线粒体DNA异质性的检测方法，其特征在于：包括以下步骤：（1）扩增线粒体DNA异质性片段：根据双峰驼线粒体D‑loop区序列，在相对保守区域设计一对引物，扩增该重复片度；PCR扩增体系为20μL，反应程序为：95℃预变性5min，94℃变性45s，62℃退火1min，72℃延伸1min，72℃延伸15min，35个循环；（2）DNA测序仪片段分析：经琼脂糖凝胶电泳检测合格后，稀释并上DNA测序仪进行片段分析；GeneMapper软件分析原始数据，进行标准曲线校对和片段分析。
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