[发明专利]一种延胡索的组织培养方法

摘要

本发明公开了一种延胡索的组织培养方法，其特征在于：包括下列步骤：1)对当年生地下经上的幼芽进行丛生芽诱导、生根培养、炼苗后进行移栽；2)对当年生带有芽点的块茎部分进行愈伤组织培养、增殖培养、生根培养、炼苗后进行移栽，通过该方法可以对延胡索进行快速增值，并实现大面积工业化种植，以解决野生延胡索产量低的短缺，以及供应少和自然栽培周期长的问题。

主权项

一种延胡索的组织培养方法，其特征在于：包括下列步骤：(1)外植体的选择与灭菌选择带有地上茎的幼芽块茎部分，将其切成小块，且每块都带有至少一个芽点；将所述带有芽点的块茎用自来水洗净，冲洗到表面没有污垢，再置于超净工作台用体积浓度75％的酒精灭菌20s，然后用无菌水冲洗干净，再将其放入到体积浓度为0.2％HgCL₂浸泡15min，然后用无菌水冲洗干净，转入培养皿中吸干水分，等待接入培养基；(2)幼芽丛生芽的诱导、块茎丛生芽愈伤组织培养和增殖培养A、将经过步骤(1)处理的幼芽转入丛生芽诱导培养基中，所述丛生芽诱导培养基的配方为：MS+6‑BA4.0mg/L+NAA0.2mg/L+琼脂7g/L+蔗糖30g/L，pH＝5.0～6.0；培养条件为温度25～30℃、光照1500‑2000Lx；光照时间为12～15小时/天，培养时间为20～30天；然后直接转入生根培养；B、①将经过步骤(1)处理的带有芽点的的块茎接种MS+6‑BA4.0mg/L+NAA0.2mg/L+琼脂7g/L+蔗糖30g/L，pH＝5.0～6.0；培养条件为温度25～30℃、光照1500‑2000Lx；光照时间为12～15小时/天，培养时间为20‑30天；中间剔除污染的块茎外植体；②在块茎组织分化形成愈伤组织后，将诱导出的愈伤组织转入培养基为MS+6‑BA3.0mg/L+NAA0.2mg/L+琼脂7g/L+蔗糖30g/L，pH＝5.0～6.0；培养条件为温度25～30℃、光照1500‑2000Lx；光照时间为12～15小时/天，培养时间为10‑20天；愈伤组织进行增殖，然后将增殖后的愈伤组织切成1.0cm*1.0cm*1.0cm大小，再转入原先的诱导培养基MS+6‑BA4.0mg/L+NAA0.2mg/L+琼脂7g/L+蔗糖30g/L，pH＝5.0～6.0培养条件为温度25～30℃、光照1500‑2000Lx；光照时间为12～15小时/天，培养时间为20‑30天；(3)生根的培养将经过步骤(2)处理的外植体转入生根培养基中培养，所述生根培养基的配方为：1/2MS+NAA0.2‑0.5mg/L+琼脂6‑8g/L+蔗糖20‑30g/L；培养条件为温度25～30℃、光照1500‑2000Lx；光照时间为12～15小时/天，培养时间为30‑40天；(4)炼苗和移栽将经过炼苗的延胡索根茎从接种瓶中取出，用清水洗掉培养基，在质量浓度为0.1％高锰酸钾溶液中消毒1min，用清水冲洗干净后，假植在腐殖质土：沙子＝1∶1(v∶v)的基质上，保持空气湿度95％以上，用遮阳网遮荫；根据成苗的时间安排栽植，在春季以后成苗则选择秋栽即9‑10月下旬，在春季之前成苗则选择春栽即3月下旬，将假植的延胡索根茎栽种到整好的露地畦内，将根茎段芽眼向上，每隔10‑15cm平放1个根茎，行距20‑25cm，覆土4‑6cm，浇足水；在土壤封冻前，畦面上盖一层有机肥或薄膜，以利保暖越冬。