[发明专利]一种通用型RNA干扰载体及其构建方法和应用无效
| 申请号： | 201310051787.X | 申请日： | 2013-02-02 |
| 公开（公告）号： | CN103160532A | 公开（公告）日： | 2013-06-19 |
| 发明（设计）人： | 常惠芸;马延滨;独军政;邵军军;高闪电;赵付荣;丛国正;林彤 | 申请（专利权）人： | 中国农业科学院兰州兽医研究所 |
| 主分类号： | C12N15/63 | 分类号： | C12N15/63;C12N15/64;C12N15/85 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 730046 甘肃*** | 国省代码： | 甘肃;62 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种通用型RNA干扰载体及其构建方法和应用，属于生物技术领域。本发明所述的干扰载体依次包括以下相连的各部分：绿色荧光蛋白、人U6启动子序列、多克隆酶切位点、人U6终止子序列、含有PCMV启动子的新霉素抗性基因、复制起始位点基因、氨苄青霉素抗性筛选基因以及用于载体线性化的酶切位点。本发明的干扰载体实现了不同操作情况下，对细胞基因表达的瞬时抑制或者稳定抑制，在建立稳定表达细胞系时，提高了转然后载体的整合效率.同时通过对hU6启动子进行改造，引入了2个酶切位点，线性化载体可以连接任意的目标oligoDNA，此oligoDNA仅含有2个额外核苷酸(即，不用于表达shRNA的核苷酸)，节省了试验成本。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 通用型 rna 干扰 载体 及其 构建 方法 应用 | ||
【主权项】：
一种通用型RNA干扰载体，其特征在于，所述的干扰载体依次包括以下相连的各部分：含有PCMV启动子的绿色荧光蛋白、人U6启动子序列、多克隆酶切位点、人U6终止子序列、含有PCMV启动子的新霉素抗性基因、复制起始位点基因、氨苄青霉素抗性筛选基因以及用于载体线性化的酶切位点；所述的通用型RNA干扰载体的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。
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