[发明专利]多能干细胞的传代方法及其用途

摘要

本发明涉及生物技术领域，具体涉及多能干细胞的传代方法及其用途。该方法包括：将定量的多能干细胞小球移入培养基中，并混合均匀；利用移液器吸取混于培养基的所述多能干细胞小球，并利用所述移液器产生的压力挤压，使其通过30-70μm细胞筛的筛网，形成混于培养基的更多的多能干细胞小团块；将所述混于培养基的多能干细胞小团块移入新的培养皿中，完成传代。该方法用于脊椎动物门的胚胎干细胞和诱导多能性干细胞的传代。本发明适于悬浮培养形成的多能干细胞小球，是一种无需酶消化的新型传代方法。利用该方法传代后多能干细胞克隆球存活率高，可以达到90％，每次传代比率可达1:8至1:10，可以满足干细胞大规模量产化的需求。

主权项

多能干细胞的传代方法，其特征在于，包括下列步骤：步骤A：将多个多能干细胞小球移入培养基中，并混合均匀；步骤B：利用移液器吸取混于培养基的所述多能干细胞小球，并利用所述移液器产生的压力挤压混于培养基的所述多能干细胞小球，使其通过30‑70μm细胞筛的筛网，形成混于培养基的多能干细胞小团块；步骤C：将所述混于培养基的多能干细胞小团块移入新的培养皿中，继续培养，完成传代；所述多能干细胞小球为悬浮培养形成的多能干细胞的球状聚集体，并且所述多能干细胞小球的直径为240±40μm。