[发明专利]一种检测农药残留的酶生物传感器制备方法

摘要

本发明涉及一种检测农药残留的酶生物传感器制备方法，其特征在于：多壁碳-壳聚糖复合物、纳米金胶的制备，层层自组装固定多层聚二烯丙基二甲基氯化铵和乙酰胆碱酯酶，乙酰胆碱酯酶传感器的制备及性能测试。多壁碳-壳聚糖复合物和纳米金胶作为载体材料修饰玻碳电极时，可以改善电极表面的微环境，促进电化学反应中电子的传递，提高电极上的电流响应。聚二烯丙基二甲基氯化铵和乙酰胆碱酯酶通过静电吸附作用层层自组装修饰玻碳电极，提高了乙酰胆碱酯酶的固定量，进而提高了生物传感器的稳定性。同过本方法制备的电流型乙酰胆碱酯酶传感器检测时间短，稳定性好，灵敏度高，再生能力强，并可用于实际样品的检测。

主权项

一种检测农药残留的酶生物传感器制备方法，其特征在于：多壁碳‑壳聚糖复合物的制备：首先制备0.5 wt% 的壳聚糖溶液，即将0.5 g壳聚糖溶解于100 ml 1.0% (v/v) 的乙酸溶液中，将1 mg多壁碳溶解于1 mL上述配备好的壳聚糖溶液中，超声振荡溶解，最后将制备好的溶液于4°C条件下保存备用；纳米金胶的制备：首先将试验中用到的所有玻璃器皿用王水清洗干净，并用蒸馏水冲洗后干燥备用，在长颈烧瓶中加入100 mL 0.01% 的HAuCl4 溶液，将烧瓶放在电炉上加热并剧烈搅拌直到溶液沸腾，迅速加入2.5 mL 1% 的柠檬酸钠溶液，溶液变成酒红色，继续加热并搅拌15 min，然后将溶液冷却到室温，并于4°C 条件下储存于棕色瓶中备用，用多壁碳‑壳聚糖复合物和纳米金胶修饰玻碳电极：将7μL多壁碳‑壳聚糖复合物滴涂在预处理好的玻碳电极上，在室温下晾干后，用磷酸盐缓冲溶液冲洗未固定上的复合物，而后用氮气小心吹干，取7 μL 纳米金胶滴涂在上述修饰有复合膜的电极上，在室温下晾干后，用磷酸盐缓冲溶液冲洗未固定上的复合物，而后用氮气小心吹干；乙酰胆碱酯酶的固定：取7 μL 乙酰胆碱酯酶溶液滴涂在上述修饰有复合膜的电极上，于20°C条件下放置30 min，而后滴涂7 μL聚二烯丙基二甲基氯化铵，并放置30 min，按上述步骤，交替修饰三次乙酰胆碱酯酶和聚二烯丙基二甲基氯化铵，乙酰胆碱酯酶生物传感器制作完成，于4℃条件下保存备用。