[发明专利]一种冰致微结构软体组织的制备方法

摘要

本发明公开了一种冰致微结构软体组织的制备方法，属于生物组织工程领域。该方法首先设计好具有软体组织通道网状微结构的模型，然后利用增材制造技术制备具有通道微结构的树脂模具，并往树脂模具中灌注纯水冷冻后剥离，从而得到具有通道微结构的冰致模具；最后在低温下往此冰致模具体系中灌注预先配置好的具有组织活体细胞、生长因子等的PVA水凝胶，待其稳定成型后，将其放置于5~10C°的环境下，直至冰致通道慢慢溶化完全，最后所获得的就是具有通道微结构的软体组织。本方法保证了通道结构在成型之前不会因外界作用发生结构变形，避免了因高温处理给原体组织带来污染；制备过程较为简便，容易操作，制备成本也很低廉，具有广泛的适用性。

主权项

一种冰致微结构软体组织的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤1、设计好具有软体组织通道网状微结构的模型；步骤2、将步骤1所构建的模型数据输入到快速成型机，并利用快速成型技术制造具有通道微结构的树脂模具；步骤3、往步骤2所得的树脂模具中灌注满纯水，并在‑5～‑10C°低温环境下进行冷冻后，将树脂模具剥离，从而得到通道微结构的冰致模具；步骤4、取用病患个体的器官组织细胞进行培养，细胞培养液为高糖DMEM培养液，其中每100ml培养液中添加有10ml胎牛血清、29.2mg谷氨酰胺和10mg青霉素/链霉素，经过多次传代达到需求数量，使用前用胰酶消化，并加入DMEM细胞培养液从而制备出具有特定细胞密度的细胞悬浮液；步骤5、根据临床需求，取具有特定PVA浓度的PVA水溶液，并将该溶液与步骤4所得到的组织细胞悬浮液按一定体积比均匀混合，温度控制在0C°；步骤6、将步骤5所得到的混合液与适量5%浓度的三磷酸钠水溶液混合均匀，以使水凝胶发生交联，并在‑5C°的低温条件下，立即将混合溶液灌注到步骤3所得到的具有通道微结构的冰致模具中，待含有组织细胞的PVA水凝胶稳定成型后将其取出，并置于5C°的环境下，直至冰致通道慢慢溶化完全，水从通道结构排出软体组织；制备出最终软体组织支架。