[发明专利]一种关节软骨移植物及其制备方法

摘要

一种关节软骨移植物及其制备方法，本发明制备的关节软骨移植物从外至内由浅层、中层和深层三层构成，每层的厚度、形状、大小均与软骨损伤部位相匹配，无需术前塑形，植入后与周围正常软骨各层分布相对应，有利于细胞间的信号传递、转导及调控，能够与周围正常软骨组织更好的整合；具有和天然软骨一致的结构特征，从浅层到深层Ⅱ型胶原含量逐渐降低，GAG含量逐渐升高，抗压性和耐磨性好；软骨移植物中的软骨细胞被细胞外基质包裹，免疫原性低，避免植入后发生免疫排斥，能够长期存活并发挥功能，提高软骨修复长期疗效。

主权项

一种关节软骨移植物的制备方法，其特征在于，从哺乳动物正常软骨组织的浅层、中层和深层分别获得各层的软骨细胞，将浅层软骨细胞与交联的Ⅱ型胶原溶胶混合，添加转化生长因子‑β后得到浅层细胞溶胶，将中层软骨细胞与交联的Ⅱ型胶原溶胶混合，添加糖胺聚糖、转化生长因子‑β、碱性成纤维细胞生长因子后得到中层细胞溶胶，将深层软骨细胞与交联的Ⅱ型胶原溶胶混合，添加糖胺聚糖、骨形态发生蛋白、转化生长因子‑β后得到深层细胞溶胶；采用三维打印技术，将浅层、中层和深层细胞溶胶按照软骨缺损部位的大小、形状和厚度，从浅层至深层的顺序分层打印，再经体外培养得到关节软骨移植物；各层之间通过交联的Ⅱ型胶原溶胶自然凝固复合而成；所述浅层软骨细胞、中层软骨细胞和深层软骨细胞分别来源于哺乳动物源性正常软骨组织的浅层、中层和深层；所述交联的Ⅱ型胶原溶胶是指将Ⅱ型胶原配制成溶液，在0℃条件下紫外线照射0.5～5小时或在0～40℃条件下加入1/5～1/10体积的质量体积浓度为0.01～2％的京尼平水溶液，交联时间为0.5～3小时，再调节pH至中性。