[发明专利]用于生产具有人可变区的抗体的可育的转基因动物

摘要

本发明尤其涉及可用于生产具有人可变区的抗体的可育的非人脊椎动物例如小鼠和大鼠，其中的内源性抗体链表达已经失活。这一失活导致定位于啮齿类重链基因座内的ADAM6基因丢失，所述基因对育性是至关重要的。导入所述ADAM6基因的功能性拷贝使得可育的小鼠可以产生。

主权项

一种制备小鼠细胞或可育小鼠的方法，所述小鼠细胞或可育小鼠对于转基因抗体重链基因座而言是纯合的，所述小鼠的基因组(a)在第12号染色体的各自拷贝上包含各转基因重链基因座；以及(b)内源性抗体重链表达失活；所述方法包括以下步骤：(c)构建转基因小鼠胚胎干细胞(ES细胞)，其包含转基因抗体重链基因座，所述构建通过将一或多个人VH基因区段、一或多个人D基因区段和一或多个人JH基因区段插入到第12号染色体的DNA中进行，这样所述人基因区段与小鼠或人重链恒定区(任选地，Cμ和/或Cγ)的上游可操作连接；(d)与步骤(c)同时或分别进行，删除所述第12号染色体的全部或部分小鼠内源性重链VDJ区，以使内源性抗体重链表达失活，其中该删除包括小鼠ADAM6基因；(e)与步骤(c)或(d)同时或分别进行，将一或多个ADAM6基因插入到ES细胞基因组；以及任选地(f)使ES细胞发育成为可育小鼠或其子代，所述可育小鼠或其子代的基因组对于所述转基因重链基因座而言是纯合的且编码ADAM6，其中基因组中的两条第12号染色体的全部或部分内源性重链VDJ区已删除；任选地，其中所述可育小鼠或子代是雄性。