[发明专利]用于操作生物分子的方法

摘要

在一些实施方案中，本公开内容提供了用于产生核酸片段群体的组合物、系统、方法和试剂盒。在一些实施方案中，群体中的至少一个核酸片段是未被标记的。在一些实施方案中，可将核酸酶促片段化。例如，用于产生核酸片段群体的方法可包括核酸切口产生反应。在一个实施方案中，所述方法可包括切口平移反应。切口产生反应可在双链核酸的任一条链上的随机位置处引入切口。切口平移反应可将切口位置移至新的位置，以便两个切口的新位置是对齐的，以产生双链断裂。切口平移反应可利用未标记的核苷酸来进行，以产生未标记的核酸片段群体。在一些实施方案中，用于产生核酸片段群体的方法可包括，将片段化的核酸的至少一个末端连接至一个或多个寡核苷酸接头。在一些实施方案中，用于产生核酸片段群体的方法可包括，将核酸与核酸结合蛋白结合。

主权项

1.一种用于产生具有减少的重排的核酸片段群体的方法，包括：(a)将至少两个不同的双链核酸分子切割成核酸片段，其中所述切割包括，通过将所述至少两个不同的双链核酸分子经历酶促切口产生条件来将至少一个切口在随机位置处引入所述至少两个不同的双链核酸分子的每一条链，从而形成带切口的双链核酸分子，其中所述酶促切口产生条件包括T4gp 32单链结合蛋白以减少重排的形成；和(b)通过切口平移所述带切口的双链核酸分子的第一条链中的一个或多个切口和第二条链中的一个或多个切口，直至相反链上的至少两个切口对齐，来在所述带切口的双链核酸分子中产生一个或多个双链断裂，其中所述切口平移用未标记的核苷酸进行。