[发明专利]用于生产甲基丙烯酸和甲基丙烯酸酯类的微生物以及与之相关的方法

摘要

本发明提供了一种非天然存在的微生物，其具有甲基丙烯酸、甲基丙烯酸酯类、3-羟基异丁酸酯和/或2-羟基异丁酸酯途径。该微生物包含编码甲基丙烯酸途径中的酶的至少一种外源性核酸。此外，本发明提供了一种用于生产甲基丙烯酸、甲基丙烯酸酯类、3-羟基异丁酸酯和/或2-羟基异丁酸酯的方法。该方法可以包括培养生产甲基丙烯酸、甲基丙烯酸酯类、3-羟基异丁酸酯和/或2-羟基异丁酸酯的微生物，其中该微生物在各种条件下以及在足以生产甲基丙烯酸、甲基丙烯酸酯类、3-羟基异丁酸酯和/或2-羟基异丁酸酯这么长的时间内，以足以生产甲基丙烯酸、甲基丙烯酸酯类、3-羟基异丁酸酯和/或2-羟基异丁酸酯的量表达编码甲基丙烯酸途径酶的至少一种外源性核酸。

主权项

一种非天然存在的微生物，其具有甲基丙烯酸途径，所述微生物包含编码甲基丙烯酸途径酶的以足以生产甲基丙烯酸的量表达的至少一种外源性核酸，所述甲基丙烯酸途径包含选自如下的途径：（a）柠苹酸合酶、柠苹酸脱水酶（柠康酸形成）以及柠康酸脱羧酶；（b）柠苹酸合酶、柠苹酸脱水酶（柠康酸形成）、柠康酸异构酶以及中康酸脱羧酶；（c）柠苹酸合酶、柠苹酸脱水酶（中康酸形成）、柠康酸异构酶以及柠康酸脱羧酶；（d）柠苹酸合酶、柠苹酸脱水酶（中康酸形成）以及中康酸脱羧酶；（e）柠苹酰‑CoA裂解酶；柠苹酰‑CoA转移酶、合成酶或水解酶；柠苹酸脱水酶（柠康酸形成）以及柠康酸脱羧酶；（f）柠苹酰‑CoA裂解酶；柠苹酰‑CoA转移酶、合成酶或水解酶；柠苹酸脱水酶（柠康酸形成）；柠康酸异构酶以及中康酸脱羧酶；（g）柠苹酰‑CoA裂解酶；柠苹酰‑CoA转移酶、合成酶或水解酶；柠苹酸脱水酶（中康酸形成）以及中康酸脱羧酶；（h）柠苹酰‑CoA裂解酶；柠苹酰‑CoA转移酶、合成酶或水解酶；柠苹酸脱水酶（中康酸形成）；柠康酸异构酶以及柠康酸脱羧酶；（i）乌头酸脱羧酶、衣康酸异构酶以及柠康酸脱羧酶；（j）乌头酸脱羧酶、衣康酸异构酶、柠康酸异构酶以及中康酸脱羧酶；（k）乌头酸脱羧酶；衣康酰‑CoA转移酶、合成酶或水解酶；柠苹酰‑CoA脱水酶；柠苹酰‑CoA转移酶、合成酶或水解酶；柠苹酸脱水酶（柠康酸形成）以及柠康酸脱羧酶；（l）乌头酸脱羧酶；衣康酰‑CoA转移酶、合成酶或水解酶；柠苹酰‑CoA脱水酶；柠苹酰‑CoA转移酶、合成酶或水解酶；柠苹酸脱水酶（柠康酸形成）；柠康酸异构酶以及中康酸脱羧酶；（M）乌头酸脱羧酶；衣康酰‑CoA转移酶、合成酶或水解酶；柠苹酰‑CoA脱水酶；柠苹酰‑CoA转移酶、合成酶或水解酶；柠苹酸脱水酶（中康酸形成）以及中康酸脱羧酶；以及（n）乌头酸脱羧酶；衣康酰‑CoA转移酶、合成酶或水解酶；柠苹酰‑CoA脱水酶；柠苹酰‑CoA转移酶、合成酶或水解酶；柠苹酸脱水酶（中康酸形成）；柠康酸异构酶以及柠康酸脱羧酶；（o）乙酰乙酰基‑CoA硫解酶；乙酰乙酰基‑CoA还原酶；巴豆酸酶；4‑羟基丁酰基‑CoA脱水酶；4‑羟基丁酰基‑CoA变位酶；3‑羟基异丁酰基‑CoA合成酶或3‑羟基异丁酰基‑CoA水解酶或3‑羟基异丁酰基‑CoA转移酶；以及3‑羟基异丁酸酯脱水酶；以及（p）乙酰乙酰基‑CoA硫解酶；乙酰乙酰基‑CoA还原酶；巴豆酸酶；4‑羟基丁酰基‑CoA脱水酶；4‑羟基丁酰基‑CoA变位酶；3‑羟基异丁酰基‑CoA脱水酶；以及异丁烯酰基‑CoA合成酶或异丁烯酰基‑CoA水解酶或异丁烯酰基‑CoA转移酶。