[发明专利]突变型孔

摘要

本发明涉及突变体形式的Msp。本发明还涉及使用Msp进行的核酸表征。

主权项

一种包含SEQ ID NO:2示出的序列的变体的突变型Msp单体，其中所述变体包含至少一种如下的突变：（a）第88位为天冬酰胺（N）、丝氨酸（S）、谷氨酰胺（Q）或苏氨酸（T）；（b）第90位为丝氨酸（S）、谷氨酰胺（Q）或酪氨酸（Y）；（c）第105位为亮氨酸（L）或丝氨酸（S）；（d）第126位为精氨酸（R）；（e）第75位为丝氨酸（S）；（f）第77位为丝氨酸（S）；（g）第59位为精氨酸（R）；（h）第75位为谷氨酰胺（Q）、天冬酰胺（N）或苏氨酸（T）；（i）第77位为谷氨酰胺（Q）、天冬酰胺（N）或苏氨酸（T）；（j）第78位为亮氨酸（L）；（k）第81位为天冬酰胺（N）；（l）第83位为天冬酰胺（N）；（m）第86位为丝氨酸（S）或苏氨酸（T）；（n）第87位为苯丙氨酸（F）、缬氨酸（V）或亮氨酸（L）；（o）第88位为酪氨酸（Y）、苯丙氨酸（F）、缬氨酸（V）、精氨酸（R）、丙氨酸（A）、甘氨酸（G）或半胱氨酸（C）；（p）第89位为苯丙氨酸（F）、缬氨酸（V）或亮氨酸（L）；（q）第90位为亮氨酸（L）、苯丙氨酸（F）、色氨酸（W）、组氨酸（H）、苏氨酸（T）、甘氨酸（G）、丙氨酸（A）、缬氨酸（V）、精氨酸（R）、赖氨酸（K）、天冬酰胺（N）或半胱氨酸（C）；（r）第91位为丝氨酸（S）、谷氨酰胺（Q）、亮氨酸（L）、甲硫氨酸（M）、异亮氨酸（I）、丙氨酸（A）、缬氨酸（V）、甘氨酸（G）、苯丙氨酸（F）、色氨酸（W）、酪氨酸（Y）、组氨酸（H）、苏氨酸（T）、精氨酸（R）、赖氨酸（K）、天冬酰胺（N）或半胱氨酸（C）；（s）第92位为丙氨酸（A）或丝氨酸（S）；（t）第93位为丝氨酸（S）、丙氨酸（A）、苏氨酸（T）、甘氨酸（G）；（u）第94位为亮氨酸（L）；（v）第95位为缬氨酸（V）；（w）第96位为精氨酸（R）、天冬氨酸（D）、缬氨酸（V）、天冬酰胺（N）、丝氨酸（S）或苏氨酸（T）；（x）第97位为丝氨酸（S）；（y）第98位为丝氨酸（S）；（z）第99位为丝氨酸（S）；（aa）第100位为丝氨酸（S）；（bb）第101位为苯丙氨酸（F）；（cc）第102位为赖氨酸（K）、丝氨酸（S）或苏氨酸（T）；（dd）第103位为丙氨酸（A）、谷氨酰胺（Q）、天冬酰胺（N）、甘氨酸（G）或苏氨酸（T）；（ee）第104位为异亮氨酸；（ff）第105位为酪氨酸（Y）、丙氨酸（A）、谷氨酰胺（Q）、天冬酰胺（N）、苏氨酸（T）、苯丙氨酸（F）、色氨酸（W）、组氨酸（H）、甘氨酸（G）、缬氨酸（V）、精氨酸（R）、赖氨酸（K）、脯氨酸（P）、或半胱氨酸（C）；（gg）第106位为苯丙氨酸（F）、异亮氨酸（I）、缬氨酸（V）或丝氨酸（S）；（hh）第108位为脯氨酸（P）或丝氨酸（S）；（ii）第118位为天冬酰胺（N）；（jj）第103位为丝氨酸（S）或半胱氨酸（C）；和（kk）第10‑15、51‑60、136‑139和168‑172位中的一个或多个位置上为半胱氨酸。